Собака новый год вектор: Изображения Год собаки | Бесплатные векторы, стоковые фото и PSD

Содержание

%d0%bd%d0%be%d0%b2%d0%be%d0%b3%d0%be%d0%b4%d0%bd%d1%8f%d1%8f %d1%81%d0%be%d0%b1%d0%b0%d0%ba%d0%b0 PNG, векторы, PSD и пнг для бесплатной загрузки

  • green environmental protection pattern garbage can be recycled green clean

    2000*2000

  • набор векторных иконок реалистичные погоды изолированных на прозрачной ба

    800*800

  • be careful to slip fall warning sign carefully

    2500*2775

  • ценю хорошо как плоская цвет значок векторная icon замечания

    5556*5556

  • blue series frame color can be changed text box streamer

    1024*1369

  • Комплекс витаминов группы В капсулы В4 на прозрачном фоне изолированные 3d визуализации

    2000*2000

  • схема бд электронный компонент технологии принципиальная схема технологическая линия

    2000*2000

  • chinese wind distant mountain pine tree chinese style pine tree chinese style poster can be combined

    3600*2475

  • happy singing mai ba sing self indulgence happy singing

    2000*2000

  • облака комиксов

    5042*5042

  • в первоначальном письме bd логотипа

    1200*1200

  • be careful of road slip warning signs fall warning signs character warning signs pattern warning signs

    2000*2000

  • break split orange be

    2000*2000

  • syafakallah la ba sa thohurun ​​in syaa allah арабская молитва для бесплатного скачивания

    2048*2048

  • Головной мозг гипноз психология синий значок на абстрактное облако ба

    5556*5556

  • be careful of electric shock signs warning signs warnings

    2000*2000

  • be careful of potholes warning signs warning signs caution

    2000*2000

  • logo design can be used for beauty cosmetics logo fashion

    1024*1369

  • big cock detailed layered can be used directly cock big cock chicken

    2000*2000

  • bd письмо 3d круг логотип

    1200*1200

  • в первоначальном письме bd логотип шаблон

    1200*1200

  • в первоначальном письме bd шаблон векторный дизайн логотипа

    1200*1200

  • be careful of electric shock safety icon caution

    2240*2856

  • желтые глаза напуганы комикс мультфильм

    5000*5000

  • сердце сердцебиение любовь свадьба в квартире цвет значок векторная icon

    5556*5556

  • hand painted chinese style pine ink ink graphics can be combined hand painted pine chinese style

    2475*3600

  • кодер кодирование компьютер список документ линии значок на прозрачных ба

    5556*5556

  • надпись laa ba sa thohurun ​​insya allah

    1200*1200

  • капсулы или пилюли витамина b4 диетические

    2000*2000

  • printing type can not be separated color chart psd white cmyk

    1024*1369

  • be careful warning signs warning signs be

    2000*2000

  • be careful and fragile warning signs round beware

    2500*2000

  • круглая буквица bd или db дизайн логотипа вектор

    5000*5000

  • attention be careful cut icon danger

    2500*2000

  • asmaul husna 81

    2020*2020

  • prohibited use mobile phone illustration can not be used

    2048*2048

  • испуганные глаза комиксов

    5042*5042

  • safety slogan be careful pay attention to safety caution

    2000*2000

  • be careful with fire pay attention to fire pay attention to fire warning icon

    2000*2000

  • beware of being down be careful pay attention to safety warning signs

    2987*3500

  • warning sign be careful of electric shock distribution box identification please do not approach

    2000*2000

  • ba угол звезда голографическая радуга лазерная наклейка

    1200*1200

  • комикс бд страшно один темно

    5042*5042

  • pop be surprised female character

    2000*2000

  • bd tech логотип дизайн вектор

    8542*8542

  • graphic dividing line cute points can be first colorful dividing line star dividing line

    3072*4107

  • black key that can be hung on the body car key key

    2000*2000

  • ink koi pray for koi exams must pass exams must be

    2000*2000

  • 3d золотые числа 81 с галочкой на прозрачном фоне

    1200*1200

  • safety signs be careful to meet be careful of steps beware of burglary

    3000*4824

  • %d0%b3%d0%be%d0%b4 %d1%81%d0%be%d0%b1%d0%b0%d0%ba%d0%b8 PNG, векторы, PSD и пнг для бесплатной загрузки

  • green environmental protection pattern garbage can be recycled green clean

    2000*2000

  • набор векторных иконок реалистичные погоды изолированных на прозрачной ба

    800*800

  • be careful to slip fall warning sign carefully

    2500*2775

  • ценю хорошо как плоская цвет значок векторная icon замечания

    5556*5556

  • blue series frame color can be changed text box streamer

    1024*1369

  • Комплекс витаминов группы В капсулы В4 на прозрачном фоне изолированные 3d визуализации

    2000*2000

  • happy singing mai ba sing self indulgence happy singing

    2000*2000

  • chinese wind distant mountain pine tree chinese style pine tree chinese style poster can be combined

    3600*2475

  • break split orange be

    2000*2000

  • syafakallah la ba sa thohurun ​​in syaa allah арабская молитва для бесплатного скачивания

    2048*2048

  • be careful of road slip warning signs fall warning signs character warning signs pattern warning signs

    2000*2000

  • Головной мозг гипноз психология синий значок на абстрактное облако ба

    5556*5556

  • be careful of electric shock signs warning signs warnings

    2000*2000

  • be careful of potholes warning signs warning signs caution

    2000*2000

  • logo design can be used for beauty cosmetics logo fashion

    1024*1369

  • be careful of electric shock safety icon caution

    2240*2856

  • сердце сердцебиение любовь свадьба в квартире цвет значок векторная icon

    5556*5556

  • кодер кодирование компьютер список документ линии значок на прозрачных ба

    5556*5556

  • надпись laa ba sa thohurun ​​insya allah

    1200*1200

  • капсулы или пилюли витамина b4 диетические

    2000*2000

  • be careful warning signs warning signs be

    2000*2000

  • be careful and fragile warning signs round beware

    2500*2000

  • attention be careful cut icon danger

    2500*2000

  • asmaul husna 81

    2020*2020

  • prohibited use mobile phone illustration can not be used

    2048*2048

  • safety slogan be careful pay attention to safety caution

    2000*2000

  • b8 b 8 письма и номер комбинации логотипа в черном и gr

    5000*5000

  • ba угол звезда голографическая радуга лазерная наклейка

    1200*1200

  • pop be surprised female character

    2000*2000

  • 3d золотые числа 81 с галочкой на прозрачном фоне

    1200*1200

  • safety signs be careful to meet be careful of steps beware of burglary

    3000*4824

  • slip carefully fall down icon alert class be

    2000*2000

  • carefully slide triangle warning sign prevent slipping be cautious

    2000*2000

  • warning sign to be repaired illustration illustration

    2834*2000

  • be careful to fall pay attention to safety fall caution

    2242*2906

  • местная надпись you must be brave письмо на английском языке

    1200*1200

  • витамин b b1 b2 b3 b4 b6 b7 b9 b12 значок логотипа холекальциферол золотой комплекс с химической формулой шаблон дизайна

    1200*1200

  • flowering in spring flower buds flowers to be placed plumeria

    2000*2000

  • витамин b1 логотип значок

    1200*1200

  • витамин b3 логотип значок дизайн типы

    1200*1200

  • big cock detailed layered can be used directly cock big cock chicken

    2000*2000

  • be careful to meet warning signs cartoon warning signs warning signs triangles will be high frequency

    2000*2000

  • номер 81 золотой шрифт

    1200*1200

  • warning sign beware of landslide be careful be

    2000*2000

  • витамин b b1 b2 b3 b4 b6 b7 b9 b12 значок логотипа холекальциферол золотой комплекс с химической формулой шаблон дизайна

    1200*1200

  • корейский традиционный бордюр 81

    1200*1200

  • be careful warning signs warning signs be

    2000*2000

  • be careful to slip warning icon water droplets carefully

    2200*2200

  • текстура шрифт стиль золотой тип № 81

    1200*1200

  • do not touch be careful burns safety warning signs logos

    2000*2000

  • Собака год китайский Новый год мультфильм вектор рисованной

    Применимые группы Для личного использования Команда запуска Микропредприятие Среднее предприятие
    Срок авторизации ПОСТОЯННАЯ ПОСТОЯННАЯ ПОСТОЯННАЯ ПОСТОЯННАЯ
    Авторизация портрета

    ПОСТОЯННАЯ ПОСТОЯННАЯ ПОСТОЯННАЯ
    Авторизованное соглашение Персональная авторизация Авторизация предприятия Авторизация предприятия Авторизация предприятия
    Онлайн счет

    Маркетинг в области СМИ

    (Facebook, Twitter,Instagram, etc.)

    личный Коммерческое использование

    (Предел 20000 показов)

    Цифровой медиа маркетинг

    (SMS, Email,Online Advertising, E-books, etc.)

    личный Коммерческое использование

    (Предел 20000 показов)

    Дизайн веб-страниц, мобильных и программных страниц

    Разработка веб-приложений и приложений, разработка программного обеспечения и игровых приложений, H5, электронная коммерция и продукт

    личный Коммерческое использование

    (Предел 20000 показов)

    Физическая продукция печатная продукция

    Упаковка продуктов, книги и журналы, газеты, открытки, плакаты, брошюры, купоны и т. Д.

    личный Коммерческое использование

    (Печатный лимит 200 копий)

    предел 5000 Копии Печать предел 20000 Копии Печать неограниченный Копии Печать

    Маркетинг продуктов и бизнес-план

    Предложение по проектированию сети, дизайну VI, маркетинговому планированию, PPT (не перепродажа) и т. Д.

    личный Коммерческое использование

    Маркетинг и показ наружной рекламы

    Наружные рекламные щиты, реклама на автобусах, витрины, офисные здания, гостиницы, магазины, другие общественные места и т. Д.

    личный Коммерческое использование

    (Печатный лимит 200 копий)

    Средства массовой информации

    (CD, DVD, Movie, TV, Video, etc.)

    личный Коммерческое использование

    (Предел 20000 показов)

    Перепродажа физического продукта

    текстиль, чехлы для мобильных телефонов, поздравительные открытки, открытки, календари, чашки, футболки

    Онлайн перепродажа

    Мобильные обои, шаблоны дизайна, элементы дизайна, шаблоны PPT и использование наших проектов в качестве основного элемента для перепродажи.

    Портрет Коммерческое использование

    (Только для обучения и общения)

    Портретно-чувствительное использование

    (табачная, медицинская, фармацевтическая, косметическая и другие отрасли промышленности)

    (Только для обучения и общения)

    (Contact customer service to customize)

    (Contact customer service to customize)

    (Contact customer service to customize)

    Вектор собаки ai | UIDownload

    Вектор собаки ai

    ключевые слова

    • Вектор собаки
    • ai
    • Вектор
    • собаки

    DMCA Contact Us

    бесплатная загрузка ( ai, 162.04KB )

    Связанная векторная графика

    • Разнообразие домашних собак ai

    • Разные собаки eps

    • Силуэты собак eps ai

    • Собака лапа бесшовный фон ai eps

    • Силуэты собак ai

    • морда собаки ai eps

    • Счастливая собака лицо вектор eps svg

    • Милые животные кошки и собаки наклейки svg eps

    • Собаки и кошки, выкройка eps

    • Симпатичная собака лицо коллекции вектор eps svg

    • Смешная собака мультфильм бесшовные модели вектор eps

    • Силуэты собаки eps

    • Векторные силуэты собак уиппет svg ai

    • Забавная собака в очках вектор материала eps

    • Смайлик милый корги собака ai eps svg

    • Разнообразие домашних собак ai

    • Собаки векторные коллекции 2 ai

    • Собаки svg eps ai

    • Забавная собака мультфильм бесшовные модели вектор eps

    • голова собаки вектор eps ai

    • Милая собака со звездами и луной карты вектор eps

    • Собака лапы и кости инсульта бесшовный фон ai eps

    • Собака odg svg

    • Собака силуэт векторов eps

    • Различные графические силуэты собак вектор eps

    • Разнообразие кошек и собак в стиле комиксов ai

    • Забавная собака в очках векторный материал eps

    • Коллекция кошек и собак eps

    • Китайский Новый год собаки со свитками баннер вектор ai

    • Собака пуделя svg ai

    • Семья собак eps

    • Собака Вектор 34 ai

    • Векторные силуэты собак уиппет высокого качества ai svg

    • Милая собака с кошкой векторные иллюстрации svg

    • Собака Вектор 33 ai

    • Яркие собаки лицо фон вектор eps

    • Кошка и собака обнять векторный материал eps

    • Силуэты кошек и собак eps

    • Черные символы — собаки ai eps

    • Ручной обращается фон головы собаки eps

    • Вектор службы груминга собак ai svg

    • Смешная собака в очках вектор материала eps

    • прыгающая собака ai eps

    • Набор собак eps

    • Порода собак портрет вектор ai

    • Маленькая коричневая собака ai

    • Собака вектор 7 ai

    • Силуэты Векторный собак ai

    • Собака вектор 46 ai

    • Далматинская собака сидит

    Загрузи больше

    • Contact Us

    «Вектор» заявил о возможности заразиться новым вирусом из-за укуса клеща :: Общество :: РБК

    Оказалось, что все ростовские образцы отличаются от известных вирусов группы JMTV. Как считают в «Векторе», люди заразились новым вирусом от тех же клещей, что переносят Крымско-Конго геморрагическую лихорадку. «Мы сделали вывод, что JMTV Manych совместно с вирусом ККГЛ способен вызывать вирусную инфекцию у человека с клиническими проявлениями, характерными для этой лихорадки», — уточнила Гладышева.

    Все заболевшие, у которых в крови нашли новый вирус, были госпитализированы с классическими симптомами лихорадки: температура около 39 градусов и озноб. Их успешно вылечили в соответствии со схемой лечения ККГЛ.

    Читайте на РБК Pro

    Врач-инфекционист, главный врач «Инвитро-Сибирь» Андрей Поздняков отметил, что пока вирус передается через укусы клещей, опасность не велика. Угрозы была бы явнее, если бы вирус распространяли комары, однако предпосылок к этому нет.

    В Индии из-за новой вспышки смертельного вируса умер ребенок

    В августе прошлого года в трех провинциях Китая начал распространяться передающийся человеку от клещей вирус SFTS, который способен привести к летальному исходу. Его возбудитель был выявлен еще в 2011 году, врачи не исключали, что вирус может передаваться от человека к человеку.

    Уточнялось, что SFTS заразились не меньше 37 человек в провинции Цзянсу на востоке КНР, и 23 человека в провинции Аньхой. Его жертвами на тот момент стали семь человек. При заражении у пациентов отмечались лихорадка, сильный кашель, снижение лейкоцитов и тромбоцитов в крови.

    Неделя потребления: выставка искусства Guerlain и новый бутик Salvatore Ferragamo

    Копировать ссылку
    Guerlain организовывает выставку в Париже, Salvatore Ferragamo снова открывает бутик во «Временах года», а Bentley катает своих клиентов по России

    Компания Bentley провела серию мероприятий Autumn Tour 2021

    Клиенты компании Bentley получили возможность взять новые автомобили бренда на тест-драйв в Новосибирске, Екатеринбурге, Москве и Санкт-Петербурге в рамках серии мероприятий Autumn Tour 2021. Финальной точкой путешествия Bentley станет побережье Геленджика. В рамках новой инициативы бренда состоялся динамический дебют эксклюзивного Continental GT Mulliner и Flying Spur V8. Также в тест-драйве приняла участие модель Bentayga Speed.

    Помимо автомобилей на мероприятиях Autumn Tour 2021 представили арт-объекты из коллекции The Art of Nature Александра Чеглакова, созданные вручную из упавших сухих дубов, возраст которых достигает более 250 лет. Художник находит актуальный смысл в природных формах и раскрывает естественную красоту натурального дерева. Компания Bentley последние годы тоже меняет подход к использованию древесины и старается максимально следовать принципам устойчивого развития. Например, при создании автомобиля Bentley Mulliner Bacalar используется только экологичная древесина тополя редкого вида, полученная из естественным образом упавших деревьев, пролежавших 5000 лет в торфяных болотах, озерах и реках Восточной Англии.

    Бренд Samsung запустил новую рекламную кампанию с Натальей Водяновой

    Компания Samsung и бренд-амбассадор Galaxy в Росcии Наталья Водянова запустили рекламную кампанию для складного смартфона Galaxy Z Flip3. Сюжет ролика построен на трех образах, которые раскрываются вместе с гибким смартфоном. Они символизируют стремление каждой девушки меняться. Наталья Водянова сегодня — не только супермодель и героиня глянцевых обложек, но и филантроп и инвестор. Это созвучно концепции смартфона Galaxy Z Flip3, способного трансформироваться благодаря гибкому экрану.

    «Я считаю важным иметь возможность открыто выражать себя и раскрывать свой потенциал, поэтому мне созвучна философия Galaxy «Выходи за рамки возможного». Новейшие технологии созданы, чтобы помогать нам в самореализации — и я с удовольствием расскажу об этом в кампании Galaxy Z Flip3», — отметила Наталья Водянова.

    Бренд Chopard вместе с часовым ателье Bamford Watch Department представила часы Mille Miglia Classic Chronograph

    Ювелирный и часовой Дом Chopard, который уже много лет производит профессиональные хронографы для автогонщиков, объединился с часовым ателье Bamford Watch Department, которое специализируется на лимитированных и эксклюзивных моделях, чтобы создать новинку Mille Miglia Classic Chronograph. Часы получили 42-миллиметровый корпус из подвергнутой дробеструйной обработке нержавеющей стали с DLC-покрытием, темно-серый циферблат с отчетливой оранжевой маркировкой и удобный эргономичный браслет. Модель снабжена механизмом хронографа, точность хода которого подтверждена сертификатом хронометра COSC.

    Во «Временах года» после реконструкции открылся бутик Salvatore Ferragamo

    В галереях «Времена года» на Кутузовском проспекте снова открылся бутик Salvatore Ferragamo. Теперь пространство украшают бархатные диваны горчичного оттенка, мебель из полированного ореха, детали интерьера из стали и латуни, мраморные полы и мягкое освещение. Обновленный бутик флорентийского Дома транслирует эстетику Salvatore Ferragamo: традиции и современность, неизменная элегантность и безусловный комфорт. В бутике представлена новая коллекция Future Positive, главная идея которой заключается в сочетании технологических инноваций и эстетической изобретательности.

    Дом Guerlain 14 год подряд принимает участие в частной ярмарке искусства FIAC

    Дом Guerlain уже в 14 раз присоединяется к частной ярмарке искусства FIAC. На этот раз бренд примет участие с новой выставкой «Когда материал становится искусством», которая будет проходить с 21 октября по 14 ноября 2021 года по адресу Елисейские Поля, 68. В этом году компания Guerlain, которая с момента своего основания выступала за новые формы проявления авангарда и художественных инноваций, приглашает зрителей увидеть экспозицию, где главной темой стала материальность искусства. Представленные на выставке художники используют собственное тело, чтобы выразить и воплотить в жизнь эмоции и идеи.

    Эксперты Filorga создали новый крем для глаз NCEF-Reverse Eyes

    Кожа вокруг глаз испытывает на себе воздействие целого спектра факторов, вызывающих ее старение: естественных возрастных изменений, усталости и стресса, загрязненной окружающей среды. При этом у кожи контура глаз есть слабое место: она в четыре раза тоньше, чем кожа на остальных зонах лица, и испытывает серьезную нагрузку. 22 мышцы, окружающие глазное яблоко, постоянно работают, производя сокращения примерно каждые 10 секунд. Поэтому именно в этой зоне зачастую проявляются первые признаки старения и усталости.

    Поэтому бренд Filorga представил первое средство для ухода за кожей вокруг глаз, созданное по принципу «умной» косметики. Его формула объединила в себе полиревитализирующий комплекс NCEF и систему доставки активных компонентов высокой точности Genius-Vector Technology. Эта новейшая разработка Filorga позволяет доставлять активные. ингредиенты точно в клетки-мишени для интенсивной коррекции возрастных изменений.

    Geox представляет коллекцию женской обуви осень-зиму 21/22

    При создании новой коллекции Geox сосредоточился на идее предложить женщинам одновременно элегантную, комфортную и функциональную обувь. Бренд представил как высокие кожаные собаки и классические ботильоны на каблуке, так и повседневные кроссовки и ботинки, приспособленные для долгих прогулок. Идея биомимикрии в мире моды отражена в капсуле, объединяющей модели из кожи с тиснением под крокодила и рисунком под змею. Это прямые сапоги и ботильоны на каблуке различной высоты, челси и туфли на высоком устойчивом каблуке с глубоким вырезом впереди.

    Новый сезон «Цифрового сада» «СберПервого» и Visa посвящен секретам гостеприимства

    Новым гостем второго сезона проекта «Цифровой сад» от «СберПервого» и Visa об эстетике потребления материальной культуры стала Татьяна Полякова, международный эксперт в сфере делового и светского этикета. Она рассказала, как правильно принимать гостей, украсить интерьер и вести себя в чужом доме свободно и раскованно, не смущая других. Татьяна подробно разобрала, как не ошибиться с подарком и красиво преподнести его хозяевам, какой дресс-код соблюдать, о чем вести светский разговор и как вежливо уйти.

    Копировать ссылку

    Национальный туроператор Алеан, Цены 2021 на отдых в России, Крыму, Абхазии, Белоруссии, Прибалтике, Грузии, Армении, Азербайджан, Киргизия, Узбекистан

    Туроператор по России, Украине, Лечение в Беларуси, отдых в Абхазии, Азербайджане, Прибалтике, Грузии, Армении, Киргизии.

    Ни для кого не секрет, что ведущие туроператоры России предлагают самый разнообразный отдых в любом уголке нашей необъятной страны. Одним из признанных лидеров в области внутреннего туризма считается Компания Алеан, имеющий собственные представительства во многих городах России. История успеха Алеана начинается с 1993 года – за 20 лет работы зарекомендовал себя как надежный партнер, предоставляющий взаимовыгодные условия сотрудничества. Наша компания организует пляжные, оздоровительные, экскурсионные, приключенческие, корпоративные и многие другие туры любой сложности.

    Давайте рассмотрим, почему же все больше туристических агентств выбирают именно Алеан, а не другие туроператоры в России?

    Многие менеджеры уже оценили преимущества нашего информационного сайта и компьютерной системы online бронирования. Специалисты компании Алеан оказывают постоянную кураторскую поддержку по всем вопросам, касающимся работы с этими интерактивными ресурсами. При условии эффективного сотрудничества с нашей компанией вы сможете разместить поисковик и каталог объектов размещения на сайте вашего агентства, а также добавить контактную информацию агентства на сайт Алеана

    Известно, что требования современных отдыхающих резко выросли, и подбирать подходящие предложения становится все сложнее. Именно поэтому мы проводим бесплатное обучение для менеджеров турагентств. Мы организуем для вас семинары и мастер-классы в различных городах, в том числе и в офисах региональных турагентств. В последнее время все большей популярностью пользуются бесплатные интерактивные вебинары – теперь обучаться и совершенствоваться вместе с нами можно в любом месте, где имеется доступ в Интернет!

    Некоторые туроператоры России организуют информационные рекламные туры для сотрудников туристических агентств. Мы готовы предложить вам такие поездки в том числе и бесплатно, в рамках специальной акции или проводимой бонусной программы.
    Ежегодно мы так же проводим Рекламные и Экскурсионные туры в Прибалтику, показываем Крурорты Азербайджана, Грузию и Армению

    Размышляя, какие же туроператоры России для вас наиболее привлекательны, имейте в виду, что российский туроператор Алеан предоставляет широкий спектр туристических услуг. Мы предлагаем комфортабельное размещение в гостиницах, пансионатах и санаториях по всей России, различные варианты отдыха на Черном и Азовском морях, лечение в Кавказских Минеральных Водах, в Карелии, на Урале, в Сибири и т.д. Увлекательные экскурсии по древним городам, круизы по живописным рекам, активные горные маршруты и другие популярные туры от компании Алеан пришлись по вкусу уже очень многим отдыхающим! На нашем сайте всегда доступны текущие спецпредложения и наиболее экономичные варианты проживания

    Многие менеджеры задаются вопросом: а что же побуждает их клиентов обращаться к известным туроператорам России, а не в желаемый отель напрямую? Действительно, чем же так интересны туры от Алеана с точки зрения отдыхающих?

    Дело в том, что наиболее опытные курортники знают, что цены на проживание и услуги в отелях, с которыми сотрудничают лучшие туроператоры России, часто намного ниже цен стоек объектов размещения. Так, наша компания имеет собственные квоты мест в гостиницах, пансионатах и санаториях многих популярных мест отдыха в России. К тому же мы предлагаем экономичные железнодорожные и авиационные билеты к турам, а также еще одну абсолютно новую и эксклюзивную услугу – бесплатное страхование юных туристов до 8 лет от внезапного заболевания или несчастного случая, возникшего во время летнего отдыха на курортах Краснодарского Края.

    Впрочем, Россия не является нашим единственным направлением. Мы также туроператор по Абхазии, предлагаем путевки на отдых в Крыму, лечение в Белоруссии и экскурсии в Санкт-Петербург и т.д.

    Популярные направления на летний сезон 2021.
    Для отдыха на море Анапа (санатории, гостиницы, отели), Сочи (санатории, отели, гостевые дома), Геленджик (пансионаты, отели, санатории), Туапсе, Крым

    Экскурсионные туры в Москве, Золотое Кольцо России, Санкт-Петербург, Беларусь

    Компания Алеан предлагает только лучшее для взрослых и детей!

    ✅ китайский новый год собака бесплатно вектор eps, cdr, ai, svg векторная иллюстрация графика

    Китайский зодиакальный символ животного

    12 животных китайского календаря

    Животные китайского календаря

    Дизайн китайских знаков зодиака

    Элементы темы собаки китайского зодиака

    2018 Китайский Новый год Собака с текстом в оттенках серого векторные иллюстрации

    2018 китайский Новый год вырезки из бумаги, год дизайна векторной собаки (китайский перевод: благоприятный год собаки, китайский календарь для года собаки 2018)

    2018 китайский Новый год вырезки из бумаги, год векторного дизайна собаки (китайский перевод: благоприятный год собаки, китайский календарь 2018 года для собаки)

    2018 китайский Новый год вырезки из бумаги, год дизайна векторной собаки (китайский перевод: благоприятный год собаки, китайский календарь для года собаки 2018)

    Счастливая восточная открытка на китайский Новый год 2018

    С новым годом 2018 года собаки.Китайский Новый год . Лунный Новый год .

    Набор баннеров с изображением собаки на китайский Новый год, цветущей вишни, фонариками

    Набор баннеров с изображением собаки на китайский Новый год, цветущей вишни, фонариками

    С Новым годом, 2018, поздравление с китайским новым годом, Год До

    С новым годом, 2018, поздравления с китайским новым годом, Год до

    Happy китайский Новый год 2018 год собаки.Лунный новый год

    Happy китайский Новый год 2018 год собаки. Лунный новый год

    2018 китайский Новый год вырезки из бумаги год собачьего векторного дизайна для

    Вектор желтая собака на китайский Новый год 2018. Цветочный узор каракули.

    Китайский Новый год 2018

    Китайский Новый год собаки 2018 открытка

    Дизайн для китайского Нового года

    Китайский Новый год 2018 год собачьего векторного дизайна.Китайский перевод: Китайский перевод: Happy Chinese New Year 2018

    Символ нового года 2018. Милая собака с блестящей текстурой блеска. Рисованной надписи Новый год. Зимние каникулы. Векторная иллюстрация Eps10.

    2018 китайский Новый год резки бумаги год собаки Векторный дизайн для вашей поздравительной открытки, листовки, приглашения, плакаты, брошюра, баннеры, календарь, китайские иероглифы означают С Новым годом, богатые.

    Китайский Новый год, год собаки

    Happy китайский Новый год вектор Eps10

    Открытка с собакой на китайский Новый год с фонарем и цветком

    Абстрактный фон китайский Новый год 2018.Год Собаки. Вектор и Иллюстрация, EPS 10

    3 талисмана китайского новогоднего зодиака: собака, тигр и лошадь

    Китайский Новый год 2018 приветствие фон. Год собаки.

    Китайский Новый год 2018 приветствие фон. Год собаки.

    Китайский Новый год 2018 приветствие фон. Год собаки.

    Китайский Новый год 2018 приветствие фон.Год собаки.

    Китайский Новый год 2018 приветствие фон. Год собаки.

    Дизайн персонажей китайского нового года. Китайский иероглиф «Гунянь да цзи» — Успешный год собаки.

    Китайский Новый год графика. Китайский иероглиф «Gou nian da ji» Процветающий в год собаки.

    Китайский Новый год графика.Китайский иероглиф «Gou nian da ji» Процветающий в год собаки.

    Изображение китайского нового года. Год собаки, идут несушками.

    Китайский Новый год 2018 приветствие фон. Год собаки.

    Китайский Новый год фон. Год собаки, Эпс идет со слоем

    Коллекция красных китайских зодиаков

    Векторные знаки китайского зодиака с годом Козы

    Собака Китайский Новый год

    Шрифт-композиция «С Новым годом» 2018 на русском языке

    Цветные символы китайского нового года

    Китайская новогодняя открытка.2018 год

    Китайская каллиграфия 2018. Китайский Новый год Собаки 2018. Лунный Новый год и весна (иероглиф: Собака)

    2018 китайский Новый год вырезки из бумаги, год собаки со сливовым цветом

    Китайский новый год собаки 2018 цвет абстрактное искусство

    Китайский Новый год собаки 2018 красочная открытка

    Китайский новый год собаки 2018 цвет абстрактное искусство

    Китайский Новый год 2018 открытка с собакой

    Китайский Новый год 2018 открытка с собакой

    Китайский Новый год 2018 открытка с собакой

    Китайский Новый год 2018 Золотая плоская открытка с собакой

    Китайский Новый год 2018 собачья лапа значок формы карты

    Китайский Новый год собаки 2018 значок карты

    Новый год собаки красный китайский paper cut art

    Китайский Новый год 2018 собака бесшовные модели карты

    Китайский Новый год 2018, золотая открытка с собакой из бумаги

    Китайский Новый год 2018 Золотая плоская открытка с собакой

    Китайский Новый год 2018 собачья лапа значок формы карты

    Китайский Новый год 2018 золотая открытка с собакой шиба-ину

    Открытка с собакой на китайский Новый год 2018 бигль

    Китайский Новый год собаки 2018 открытка из бумаги

    Китайский Новый год собаки 2018 плоская арт-карта

    Китайский Новый год собаки 2018 фон значка

    Китайский Новый год 2018 плоская золотая открытка с собакой

    Китайский Новый год 2018 собачья лапа значок формы карты

    Китайский Новый год 2018 современная открытка для собак из бумаги

    Китайский новый год собаки 2018 цвет абстрактное искусство

    Китайский Новый год 2018 открытка с собакой

    Китайский Новый год собака 2018 бульдог открытка

    Китайский Новый год собаки 2018 плоская арт-карта

    Китайский Новый год 2018 собака значок открытка

    Китайский Новый год 2018 плоская золотая открытка с собакой

    Китайский Новый год 2018 собака значок открытка

    Китайский Новый год 2018 Золотая собака вырезка из бумаги

    Китайский Новый год 2018 собака бесшовные карты

    Китайский Новый год 2018 современная открытка для собак из бумаги

    Китайский Новый год 2018 открытка с собакой

    Китайская новогодняя собака 2018 золотая открытка из бумаги

    Китайский Новый год собаки 2018 значок карты

    Китайский Новый год 2018 плоская золотая открытка с собакой

    Китайский новый год собаки разноцветная открытка со щенком

    Китайский новый год собаки абстрактный окрас щенок

    Китайский Новый год собаки вырезка из бумаги открытка

    Китайский Новый год собаки вырезка из бумаги открытка

    Счастливый китайский Новый год 2018 баннерная карта с золотым азиатским декоративным орнаментом и традиционной каллиграфией, что означает собаку.Eps10 вектор.

    Счастливый китайский Новый год 2018 баннерная карта с золотым азиатским декоративным орнаментом и традиционной каллиграфией, что означает собаку. Eps10 вектор.

    Поздравительная открытка с китайским Новым годом 2018 с золотым азиатским украшением и традиционной каллиграфией, что означает собаку. Eps10 вектор.

    Китайский Новый год собаки 2018 арт-открытка

    Китайский Новый год собаки 2018 открытка

    Открытка с новым годом собаки 2018 типографика

    Китайский новый год собаки 2018 цвет абстрактное искусство

    Китайский Новый год собаки 2018 красочная открытка

    Китайский Новый год 2018 абстрактная открытка с собакой

    Китайский новый год собаки 2018 цвет абстрактное искусство

    Китайский Новый год собаки 2018 красочная открытка

    Собака Новый год PNG, Вектор, PSD и Клипарт с прозрачным фоном для бесплатной загрузки

  • Рекламный плакат кануна Нового года 2018 собака

    640 * 853

  • 2018 год собаки значок Нового года

    2000 * 2500

  • мультфильм собака новый год прекрасный год собаки

    3000 * 3000

  • 2018 год собаки новый год праздничный

    3000 * 3222

  • милый мультфильм 2018 год собаки новый год

    2000 * 2000

  • золотая собака новый год красный плакат

    640 * 854

  • собака канун нового года 2018 год собаки новый год ежегодная встреча фон собаки

    3240 * 4320

  • год собака собака новый год новая весна

    2000 * 2000

  • 2018 год собаки новый год собака новогодний фестиваль продвижение плакат дверь год

    3240 * 4320

  • собака канун нового года 2018 год собаки новогодний фестиваль плакат собака год

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новый год 2018

    3456 * 2048

  • золотая собака новый год красный рекламный плакат

    2362 * 3150

  • 2018 год собаки новогодняя атмосфера программа празднования собаки новый

    3240 * 4320

  • канун нового года собака канун нового года

    640 * 853

  • 2018 год собаки новый год фонарь фестиваль собаки новый

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новогодняя вечеринка плакат собаки 2018 wuxu

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новогодний постер собаки 2018 усю

    3240 * 4320

  • красный китайский ветер собака новогодний гала одиночные игры дизайн книги

    640 * 453

  • 2018 год собака новый год атмосфера изысканный фестиваль плакат год

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки день нового года канун нового года

    2362 * 2362

  • праздничный год собаки новогодний стенд весенний год

    3240 * 4320

  • 2018 отставка старой собаки новогодний рекламный стенд

    640 * 1646

  • 2018 год собаки новогодняя выставочная доска год собаки

    3240 * 4320

  • новый год собака мультфильм собака милая собака новый год

    1950 * 1611

  • 2018 год собаки новогодний праздник фестиваль стенд собаки

    3240 * 4320

  • год собаки новогодний рекламный плакат шаблон год собаки

    3240 * 4320

  • свежий c4d2018 год собаки новогодний фестиваль плакат год

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новый год захватите выставочный стенд собаки

    3240 * 4320

  • свежая мода c4d2018 собака новогодний плакат год собаки

    3240 * 4320

  • мультфильм собака год собака новый год 2018 весенний фестиваль

    1000 * 1000

  • taobao tmall собака канун нового года taobao баннер taobao баннер

    1920 * 600

  • победа в год собаки новогодняя вечеринка плакат собаки 2018 wuxu

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки плакат нового года плакат день нового года

    3240 * 4320

  • канун нового года 2018 собака канун нового года отель канун нового года плакат собаки новый

    3240 * 4320

  • китайский ветер собака новый год китайский новый год программа празднования стиль год

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новый год конец ди nner постер ужин хвост ужин фон полночь

    3240 * 4320

  • свежий и простой 2018 год собаки новый год ежегодная вечеринка гала собаки новый

    3240 * 4320

  • эстетический китайский ветер 2018 год собаки новый год годовая программа вечеринки стиль 2018 год

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки дизайн новогодней вечеринки шаблон psd стиль 2018 год

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новый год мультфильм милая собака календарь календарь собачки новый

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новогодняя вечеринка дизайн программы psd шаблон новый

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новый год новый год фестиваль фонарей гала стиль 2018 год

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новый год новый год фестиваль фонарей гала стиль 2018 год

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки день нового года новогодняя вечеринка ежегодная встреча программа стиль дизайна 2018 год

    3240 * 4320

  • золотая собака новый год 2018 красная выставка доска собака 2018 праздник новый год красный

    3240 * 4320

  • собака новый год 2018 год собаки новый год большой красный праздничный плакат красный праздничный год собаки

    3240 * 4320

  • более 2018 год собаки новогодний фестиваль плакат рыба каждый год есть

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новый год фу собака весенний фестиваль красная атмосфера программа стиль 2018 год

    3240 * 4320

  • 2018 год собаки новогодний ужин книга плакат собака новый

    3240 * 4320

  • 2018 открытая дверь красная собака новогодний плакат psd шаблон дверь год

    3240 * 4320

  • китайский год собаки Векторный клипарт в AI, SVG, EPS, PSD, PNG

    2018, год собаки, с новым годом, лунный новый год, китайский новый год, корейский новый год, тет, собака вырезка из бумаги

    С новым китайским 2018 годом.Неоновая вывеска, яркий плакат, светящийся баннер, ночная неоновая вывеска, приглашение, открытка. Собака зодиака китайского календаря. Векторная иллюстрация для ваших праздничных проектов.

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с помощью китайской каллиграфии, что означает собака

    12 животных китайского зодиака используются для обозначения лет по лунному календарю в следующем порядке: крыса, бык, тигр, кролик, дракон, змея, лошадь, коза, обезьяна, петух, собака и свинья.

    Животный материал для вектора

    2018, год собаки, с новым годом

    Вектор золотые монеты китайский Новый год фон

    Отметьте китайский Новый год в 2018 году с собаками и китайскими буквами на золотом фоне, а китайские фразы означают наилучшие пожелания в наступающем году!

    Текст гласит: С Новым годом

    12 Китайские каллиграфические знаки зодиака — это слова животных, используемые для обозначения лет по лунному календарю, в следующем порядке: крыса, бык, тигр, кролик, дракон, змея, лошадь, коза, обезьяна, петух, собака и свинья.

    2018 китайский новый год шаблон мультяшной собаки с золотым слитком (сокровище) (подпись: L: весна 2018, год собаки; R: желаю вам процветающего нового года и гонг си фа цай)

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с золотым цветочным узором и собаками на заднем плане, китайская каллиграфия означает Год Собаки

    Новый китайский год 2018 вектор поздравительных открыток. Неоновая вывеска, символ зимних праздников. С Новым годом китайский 2018.Неоновая вывеска, флаер, сияющая открытка, праздничное приглашение. Редактирование текста неоновая вывеска.

    Собака, год собаки, зодиак, знак китайского зодиака

    2018, год собаки, с новым годом

    собака вырезать из бумаги, векторные иллюстрации

    2018, год собаки, с новым годом

    Набор дизайн баннера китайский Новый год: год собаки 2018. Вектор китайский старинный шаблон дизайна. (подпись: благословение; с новым годом)

    Собака — знак китайского зодиака в честь Китайского Нового 2018 года

    Китайский Новый год 2018.Год собаки. Векторный плакат с собаками, цветами и фонарями.

    2018, год собаки, с новым годом

    Китайский лунный Новый год поединок танца льва изолирован на белом фоне, счастливый танцор в традиционном китайском костюме держит красочную маску дракона на параде или карнавале, мультяшном стиле векторные иллюстрации.

    2018 год собаки по китайскому гороскопу

    полный набор векторных животных китайского зодиака

    Отметьте китайский Новый год в 2018 году, и китайская формулировка означает Год Собаки по китайскому календарю.

    2018 китайский новый год шаблон мультяшной собаки с золотым слитком (сокровище) (подпись: L: весна 2018, год собаки; R: желаю вам процветающего нового года и гонг си фа цай)

    2018 год собаки.Симпатичные мультяшные собаки с речевым пузырем: woof & wang, изолированные на красном фоне. (подпись: желаю вам удачного Нового года)

    Отметьте китайский Новый год в 2018 году Собаки с украшением из цветов, счастливого узла, облака, денежного знака, а китайские иероглифы означают Год Собаки

    Баннеры китайского зодиака с указанием года и элементов

    2018, год собаки, с новым годом, собака вырезка из бумаги

    Китайский Новый год, год собаки.Перевод китайской каллиграфии основной: «Год благоприятной собаки», старинная собачья китайская каллиграфия. Красная печать: старинная собачья каллиграфия

    полный набор векторных символов животных китайского зодиака

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с использованием китайской бумажной графики, и китайская формулировка вокруг символа означает Год Собаки, связанный с китайским календарем

    Год собаки 2018. Векторный шаблон новогодний дизайн по китайскому календарю.

    2018, год собаки, с новым годом, собака вырезка из бумаги, собака вырезка из бумаги

    2018 год собачьего дизайна шаблона поздравительной открытки. Симпатичные мультяшные собаки с китайским двустишием. (подпись: желаю вам процветания, удачи, чудесного и благополучного Нового года)

    Собака — китайский знак зодиака для китайского Нового 2018 года, китайская формулировка означает Год Собаки, связанный с китайским календарем

    .

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с счастливым кулоном, декором и огнями, висящими на заднем плане, китайская формулировка означает собака

    Вектор каллиграфии 2018 для азиатского лунного года.Иероглиф: Год собаки, с Новым годом.

    12 Китайский зодиакальный каллиграфия — это слова животных, используемые для обозначения лет по лунному календарю, основанного на двенадцатилетнем цикле, в следующем порядке: крыса, бык, тигр, кролик, дракон, змея, лошадь, коза, обезьяна, петух, собака и свинья.

    векторная иллюстрация механической собаки на новый год 2018 в стиле велоспорт, для рекламы и поздравлений

    2018, год собаки, с новым годом, символ фу

    Новый год собаки 2018 — надписи на белом фоне.Традиционный китайский дракон, древний символ азиатской или китайской культуры, украшения, мифология животных векторные иллюстрации.

    2018, год собаки, с новым годом, китайский новый год, лунный новый год

    Китайский лунный Новый год поединок танца льва изолирован на белом фоне, счастливый танцор в традиционном китайском костюме держит красочную маску дракона на параде или карнавале, мультяшном стиле векторные иллюстрации.

    Вектор золотые китайские новогодние монеты рамка для поздравлений

    2018, год собаки, с новым годом, знак фу, Kung Hei Fat Choy

    Китайский Новый год цвета собаки с двенадцатью зодиаками с китайским символом крысы, быка, тигра, дракона, кролика, змеи, обезьяны, лошади, козы, петуха, собаки, свиньи, текст в круговой шкале серого, векторная иллюстрация

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с использованием китайской письменности на заднем плане, а китайские фразы означают пожелать вам удачи в Год Собаки

    Собака — знак китайского зодиака в честь Китайского Нового 2018 года

    Китайский новогодний плакат, слова «Год процветающей собаки» на китайском языке на весеннем куплете, элементы красных фонарей, красный и золотой тон

    12 животных китайского зодиака используются для обозначения лет по лунному календарю на основе двенадцатилетнего цикла в следующем порядке: крыса, бык, тигр, кролик, дракон, змея, лошадь, коза, обезьяна, петух, собака и свинья. .

    Отметьте китайский Новый год в 2018 году Собаки с украшением из цветов, счастливого узла, облака, денежного знака и китайских иероглифов, означающих собаку

    иллюстрация eps.10

    Отметьте китайский Новый год в 2018 году с цветами сливы и собачьей подвеской на заднем плане, китайская каллиграфия означает Год Собаки

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с фонарями и сверкающими огнями на заднем плане, а китайская формулировка означает собака

    2018, год собаки, с новым годом

    2018, год собаки, с новым годом, лунный новый год, китайский новый год, корейский новый год, тет

    Собака — знак китайского зодиака в честь Китайского Нового 2018 года

    Набор плакатов для вечеринки в честь китайского Нового года 2018.Коллекция Неоновые вывески, яркий плакат, яркий баннер, ночная неоновая вывеска, приглашения, открытки. Создайте шаблон приглашения на вечеринку. Векторная иллюстрация.

    12 животных китайского зодиака используются для обозначения лет по лунному календарю в следующем порядке: крыса, бык, тигр, кролик, дракон, змея, лошадь, коза, обезьяна, петух, собака и свинья.

    Отметьте китайский Новый год в 2018 году Собаки с украшением из цветов, счастливого узла, облака, денежного знака и китайских иероглифов, означающих собаку

    Векторная иллюстрация собаки с резным узором для вашего творчества

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с украшением фонарей, цветов и китайской рамкой, а китайская каллиграфия означает Год Собаки

    Китайский новогодний рекламный плакат в неоновом стиле.Неоновая вывеска, яркий баннер, беспламенная неоновая вывеска на новогоднюю скидку. Флаер, открытка, акция «Яркие ночные распродажи». Векторная иллюстрация.

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки с помощью китайской каллиграфии, что означает собака, а китайская формулировка означает Год Собаки по китайскому календарю.

    Китайские новогодние распродажи в коллекции постеров неонового стиля. Векторная иллюстрация, неоновая вывеска, яркий баннер, светлая открытка, неоновые буклеты для новогодних скидок.С новым китайским годом.

    знак удачи, год собаки, с новым годом, знак фу, 2018

    Классная доска Китайский Новый год Год Собаки 2018: Каллиграфический перевод «С Новым годом» и «Год собаки». Красный штамп с старинной каллиграфией собаки.

    Новый китайский год продажи вектор плакат. Неоновая вывеска, яркая ночная реклама в новогодние праздники. Неоновый баннер, яркая брошюра, световой баннер, листовка, флаер, открытка. Векторная иллюстрация.

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с украшением фонарей, цветов, облаков, собак и китайской письменности на заднем плане, а китайские фразы означают наилучшие пожелания в наступающем году!

    Классная доска Год собаки китайский Новый год 2018: каллиграфический перевод «С Новым годом» и «Год собаки».Красный штамп с старинной каллиграфией собаки.

    12 животных китайского зодиака используются для обозначения лет по лунному календарю в следующем порядке: крыса, бык, тигр, кролик, дракон, змея, лошадь, коза, обезьяна, петух, собака и свинья.

    Шаблон оформления поздравительной открытки с китайской каллиграфией на Новый год собаки 2018. Рисованной надписи на старинных тонких гранж-фон. Векторная иллюстрация

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с оформлением фонарей, цветов, облака, собаки и китайской письменности на заднем плане, а китайские фразы означают пожелать вам удачи в Год Собаки

    Отметьте китайский Новый год в 2018 году Собаки с украшениями фонарей, цветов, счастливого узла, облака и китайского домика, китайские фразы означают наилучшие пожелания в наступающем году!

    2018, год собаки, с новым годом, китайский новый год, лунный новый год

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с помощью китайской каллиграфии, что означает собака, а китайская формулировка вокруг символа означает Год Собаки по китайскому календарю

    2018, год собаки, с новым годом, собака вырезка из бумаги

    2018, год собаки, с новым годом, собака вырезанная из бумаги

    Плакат с новым китайским годом 2018.Неоновая вывеска, яркий плакат, яркий баннер, ночная неоновая вывеска, приглашение, открытка. Создайте шаблон приглашения на вечеринку. Векторная иллюстрация.

    Отметьте китайский Новый год в 2018 году с украшением фонарей, счастливого кулона, облака и собаки на заднем плане. Китайская каллиграфия означает наилучшие пожелания в наступающем году!

    знак удачи, год собаки, с новым годом, знак фу, 2018

    Вектор азиатской каллиграфии 2018 для азиатского лунного года.Иероглифы и печать: Год собаки, С Новым годом, удача, весна, мир и благополучие

    знак удачи, год собаки, с новым годом, знак фу, 2018

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки 2018 с украшением счастливого кулона и облака на заднем плане, китайские фразы означают Год Собаки, связанный с китайским календарем

    2018 год собачьего шаблона поздравительной открытки. Милая мультяшная собака с китайским свитком — безопасно и мирно.(перевод: мир с вами в этом году; 2018; весна)

    2018, год собаки, с новым годом, лунный новый год, китайский новый год, корейский новый год, тет, собака вырезка из бумаги, собака вырезка из бумаги

    Отметьте китайский Новый год в год Собаки с помощью китайской каллиграфии, что означает собака, а вертикальная китайская формулировка означает Год Собаки по китайскому календарю.

    Повышенное привлечение песчаных мух-переносчиков Leishmania infantum к собакам, инфицированным зоонозным висцеральным лейшманиозом

    PLoS Negl Trop Dis.2021 июл; 15 (7): e0009647.

    , Концептуализация, Исследование, Методология, Визуализация, 1 , Исследование, Методология, 1 , Формальный анализ, Методология, 2 , Методология, 1 , Методология, 1 , Привлечение финансирования, Управление проектом, Написание — просмотр и редактирование, 3 , формальный анализ, написание — просмотр и редактирование, 4 и, концептуализация, формальный анализ, получение финансирования, администрирование проекта, надзор, визуализация, написание — первоначальный черновик, написание — просмотр и редактирование 1 , *

    Ifhem Chelbi

    1
    Подразделение векторной экологии, Institut Pasteur de Tunis, Тунис, Тунис

    Khouloud Maghraoui

    1
    Подразделение векторной экологии, Institut Pasteur de Tunis, Тунис, Тунис

    Sami Zhioua

    2
    Лаборатория биоинформатики, математики и статистики, Institut Pasteur de Tunis, Тунис, Тунис

    Сайфедин Черни

    1
    Подразделение векторной экологии, Institut Pasteur de Tunis, Тунис, Тунис

    Имен Лабиди

    1
    Подразделение векторной экологии, Institut Pasteur de Tunis, Тунис, Тунис

    Abhay Satoskar

    3
    Кафедры патологии и микробиологии, Государственный университет Огайо, Колумбус, Огайо, Соединенные Штаты Америки

    Джеймс Г.К. Гамильтон

    4
    Отделение биомедицины и наук о жизни, Ланкастерский университет, Ланкастер, Соединенное Королевство

    Elyes Zhioua

    1
    Подразделение векторной экологии, Institut Pasteur de Tunis, Тунис, Тунис

    Давид Соейро Барбоса, редактор

    1
    Подразделение векторной экологии, Institut Pasteur de Tunis, Тунис, Тунис

    2
    Лаборатория биоинформатики, математики и статистики, Institut Pasteur de Tunis, Тунис, Тунис

    3
    Кафедры патологии и микробиологии, Государственный университет Огайо, Колумбус, Огайо, Соединенные Штаты Америки

    4
    Отдел биомедицины и наук о жизни, Ланкастерский университет, Ланкастер, Соединенное Королевство

    Федеральный университет штата Минас-Жерайс, БРАЗИЛИЯ

    Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

    Поступила 13.02.2021 г .; Принято 13 июля 2021 г.

    Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Abstract

    Предпосылки

    Песчаная муха Phlebotomus perniciosus является основным переносчиком Leishmania infantum , этиологического возбудителя зоонозного висцерального лейшманиоза в бассейне Западного Средиземноморья.Собаки — главный резервуарный хозяин этой болезни. Основная цель этого исследования состояла в том, чтобы определить, как в лабораторных, так и в полевых условиях, инфицированы ли собаки L . infantum , были более привлекательными для женщин P . perniciosus, , чем неинфицированные собаки.

    Методология / основные результаты

    Мы провели серию экспериментов по выбору хозяина и обнаружили, что инфицированные собаки были значительно более привлекательными для P . perniciosus, , чем неинфицированных собак как в лаборатории, так и в полевых условиях.Значительно больше P . perniciosus питался инфицированными собаками, чем неинфицированными. Однако плодовитость P . perniciosus , питавшийся инфицированными собаками, подвергся неблагоприятному воздействию по сравнению с неинфицированными собаками из-за снижения количества отложенных яиц. Phlebotomus perfiliewi , второй по численности вид песчаных мух на полевом участке и компетентный переносчик L . infantum имел те же тенденции привлекательности, что и P . perniciosus в отношении инфицированных собак в полевых условиях.

    Выводы

    Результаты убедительно показывают, что L . infantum вызывает физиологические изменения в резервуаре-хозяине, в результате чего хозяин становится более привлекательным как для мужчин, так и для женщин. P . perniciosus . Эти изменения, вероятно, повысят шансы на успешную передачу из-за увеличения контактов с инфицированными хозяевами, и поэтому инфицированные собаки должны быть особо нацелены на борьбу с зоонозным висцеральным лейшманиозом в Северной Африке.

    Об авторе

    Зоонозный висцеральный лейшманиоз — это забытое тропическое заболевание, вызываемое паразитом Leishmania infantum . В бассейне Западного Средиземноморья основными переносчиками L являются Phlebotomus perniciosus и Phlebotomus perfiliewi . infantum , и собаки являются основным резервуарным хозяином паразита. В Северной Африке ZVL поражает в основном детей младше 5 лет. Понимание химической экологии, определяющей взаимоотношения между переносчиком, паразитом и резервуарным хозяином, имеет большое эпидемиологическое значение.Предыдущие исследования на моделях грызунов показали, что инфекция L . infantum увеличивал привлекательность по отношению к Lutzomyia longipaplis , главному переносчику ZVL в Америке. В этом исследовании мы впервые сообщили, что инфицированные собаки очень привлекательны как для самцов, так и для самок. P . perniciosus в лабораторных и полевых условиях по сравнению с неинфицированными собаками. Подобные закономерности наблюдались с дикими популяциями P . perfiliewi . Наши результаты предоставили убедительные доказательства того, что паразиты манипулируют резервуарными хозяевами, чтобы повысить успешность передачи через переносчик.

    Введение

    Зоонозный висцеральный лейшманиоз (ZVL) — это трансмиссивное зоонозное заболевание, вызываемое паразитом Leishmania infantum , который передается через укусы самок москитов-флеботоминов. ZVL может поражать как людей, так и собак, и ВОЗ считает его одной из наиболее серьезных тропических болезней, которым не уделяется должного внимания.Он поражает около 0,5 миллиона человек в год [1,2] и широко распространен в Южной и Центральной Америке, Северной Африке, Южной Европе, странах Среднего и Дальнего Востока. Распространение ZVL сильно коррелирует с бедностью [3], а в Тунисе это внутрихозяйственное заболевание, в основном эндемичное для сельских районов, поражающее семьи с низким социальным и экономическим статусом [4].

    ZVL — системное заболевание, которое при отсутствии лечения часто приводит к смерти инфицированных людей. Эффективной вакцины от висцерального лейшманиоза человека не существует [5], а в Тунисе заболеваемость этой болезнью составляет от 100 до 160 случаев на 100 000 жителей [2], а уровень смертности составляет 6% [6].Заболеваемость ZVL наиболее высока среди детей в возрасте от 1 до 2 лет [4]. В предыдущем исследовании мы показали, что педиатрические пациенты, госпитализированные через 15 дней после появления симптомов, с кровотечением, количеством лейкоцитов ниже 4000 / мм 3 и цитолизом при поступлении следует рассматривать как тяжелые случаи, и впоследствии они подвергаются высокому риску смертность [7].

    Домашние собаки являются основным резервуаром для л . infantum в Старом Свете [8,9] и в Новом Свете [10] и москиты подрода Larroussius , преимущественно Phlebotomus perniciosus , являются основными переносчиками ZVL в Тунисе [9,11,12 ].Другие виды песчаных мух подрода Larroussius , в основном Phlebotomus perfiliewi , также играют важную роль в передаче ZVL по всему Средиземноморскому бассейну, включая Тунис [12–14]. В предыдущих исследованиях в Тунисе мы показали, что распространенность ZVL у собак является важным параметром для определения передачи вируса человеку [4,15]. Таким образом, понимание динамики передачи паразита между собачьим резервуаром-хозяином и переносчиком песчаных мух P . perniciosus имеет большое эпидемиологическое значение.

    Песчаные мухи используют запахи, тепло, CO 2 хозяина [16–18] и феромоны пола / агрегации, испускаемые самцами москитов [19,20], чтобы идентифицировать и ориентироваться на потенциальных животных-хозяев для кровяной муки и приобретение помощника. А Р . perniciosus может питаться множеством позвоночных-хозяев для получения кровяной пищи [21], собаки остаются основным резервуарным хозяином для л . infantum [4,9].С эко-эпидемиологической точки зрения паразиту необходимо перекрытие между вектором ( P , perniciosus ) и резервуарным хозяином (собаками), что является предпосылкой для появления очага ZVL. Известно, что для достижения этого совпадения некоторые паразиты манипулируют животным-хозяином, изменяя его запах или поведение, чтобы повысить свои шансы передачи [22]. Было показано, что после заражения L . infantum , хомяки стали значительно более привлекательными для самок Lutzomyia longipalpis , переносчик ZVL в Южной Америке [23,24].

    Мы предположили, что физиологические изменения у собак, паразитирующих на L . infantum изменяет запах собаки, делая ее более привлекательной на P . perniciosus и, следовательно, способствуя успешной передаче паразита. Чтобы проверить эту гипотезу, привлекательность инфицированных и неинфицированных собак составляет P . perniciosus были оценены как в лабораторных, так и в полевых условиях.

    Материалы и методы

    Заявление об этике

    Содержание животных и экспериментальные процедуры, используемые в этой исследовательской программе, соответствовали Протоколу ухода за животными и их использования, который утвержден Комитетом по уходу за животными и использованию Института Пастера Туниса, Тунис (2018/01 / I / ES / IPT / V0).Инфицированные собаки, используемые в этой программе исследования, были получены в результате предыдущего исследования, которое было одобрено Комитетом по уходу и использованию животных Института Пастера в Тунисе (IPT / UESV / 27/2012). Эта работа была выполнена под контролем Управления защиты лабораторных животных США [Подтверждение гарантии F-16-00170 (A5743-01)]. Institut Pasteur de Tunis соблюдает Европейскую директиву по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных и других научных целях (2010/63 / EU).

    Оценка привлекательности самок

    Phlebotomus perniciosus для инфицированных и неинфицированных собак в лабораторных условиях

    Песчаные мухи, использованные в этом исследовании, были из колонии, происходящей из Туниса и содержавшейся в Лаборатории экологии переносчиков при Institut Pasteur de Tunis с 2003 года. [25,26]. Собаки, использованные в исследовании, были из питомников Institut Pasteur de Tunis. Мы использовали 6 собак породы бигль, которые были естественно инфицированы L . infantum в рамках другого исследования по изучению эффективности вакцины против собачьего ZVL.Эти собаки подвергались укусам диких песчаных мух в естественных условиях в центре ZVL, расположенном в Борж-Юсефе в провинции Ариана (36 ° 57’N, 10 ° 05’E), и принадлежали к невакцинированной (контрольной) группе. Инфекционный статус инфицированных собак подтверждали непрямым иммунофлуоресцентным тестом на антитела (IFAT), как описано Ben Slimane et al. (2014) [9]. Все видов Leishmania, выделены из собранных в полевых условиях самок P . perniciosus в Тунисе были идентифицированы как L . infantum зимодема MON-1 [11,21]. В Тунисе зимодема MON-1 ответственна за большинство случаев заболевания людей и собак [8,27]. Собаки содержались в вольерах после периода воздействия, и у них проявлялись клинические признаки через 11–14 месяцев после укусов диких песчаных мух. Все собаки с симптомами, демонстрирующие специфические признаки ZVL, включая лимфаденомегалию, гепатомегалию, спленомегалию и прогрессирующую потерю веса, были классифицированы как инфицированные при включении в наше исследование. Кроме того, в качестве контроля использовали 6 незараженных гончих из питомника.

    Зараженность инфицированных и незараженных собак москитами подтверждена ксенодиагностикой [9]. Минимум от 36% до 100% колонизированного в лаборатории P . perniciosus , которых кормили инфицированными собаками, развил L . infantum инфекций при препарировании и исследовании под препарирующим микроскопом, как описано Chelbi и Zhioua (2019) [28], тогда как ни одна из москитов, питавшихся неинфицированными собаками, не была инфицирована паразитами.

    Зараженные собаки были размещены индивидуально в одной части собачьего питомника, где они получали ежедневную регулярную ветеринарную помощь.Незараженные собаки содержались в отдельной части вольера. Были приняты защитные меры, чтобы избежать заражения неинфицированных собак, как описано Ben Slimane et al. (2014) [9]. Каждую инфицированную собаку распределили по полу (6 кобелей и 6 сук) и возрасту (от 3 до 4 лет), но не по весу, с неинфицированной. Эти пары затем использовались как в лабораторных, так и в полевых экспериментах.

    Для оценки предпочтения женщин P . perniciosus для инфицированных или неинфицированных собак мы провели эксперимент простого выбора ().Проволочные каркасы трех клеток Барро (клетки A, B и C), каждая размером (40 x 40 x 40 см), были приварены друг к другу, чтобы создать каркас размером 120 x 40 x 40 см. Три клетки с сеткой были подвешены в линию внутри рамы. Средняя клетка для сетки (B) была соединена с двумя клетками слева (A) и справа (C) через отверстия (диаметр x 10 см), прорезанные в сети. Одну инфицированную собаку и ее неинфицированную пару анестезировали внутримышечной (IM) инъекцией смеси 1,5 мл кетамина (15 мг / кг) (Merial, Lyon, France) и 0.02 мл / кг малеата ацепромазина (Kela, N.V., Hoogstraten, Бельгия). Поскольку кожа ушей является лучшим показателем заразности переносчиков [29], головы инфицированных и неинфицированных собак были помещены в секции A и C соответственно трех соединенных клеток на 80 минут (). Не менее 200 женщин и 20 мужчин, не инфицированных в лаборатории, колонизировали P . Затем perniciosus (F 29) были выпущены в центральную часть клетки (B), и самкам была предоставлена ​​возможность выбрать инфицированного или неинфицированного хозяина в секции A или C.Самцы москитов присутствовали, чтобы стимулировать кормление самок [25,26], но мы не определяли их предпочтения. Возраст песчаных мух без корма составлял от 5 до 7 дней, и они не содержали сахара в течение 24 часов перед использованием в этом эксперименте.

    Эксперимент по привлечению внимания хозяев в лаборатории.

    Доступ из центральной части B устройства к секциям A и C был первоначально ограничен сеткой, помещенной поверх соединительных отверстий. После того, как москиты были помещены в центральную секцию, им дали возможность акклиматизироваться в течение (20 минут), затем сетка, закрывающая соединительные отверстия обеих секций A и C, была снята, чтобы обеспечить свободное движение P . perniciosus в сторону инфицированной или неинфицированной собаки. Через 20 минут соединительные отверстия между центральной секцией B и боковыми секциями A и C были закрыты. Затем москитам позволяли кормиться собаками, находившимися под воздействием седативных средств, в течение 60 минут в темноте при 27 ° C. По истечении этого времени количество набитых и голодных самок Р . Подсчитывали perniciosus в секции A и C, а также подсчитывали количество самок в секции B [считавшихся не отвечающими (NR)].Эксперимент повторили шесть раз с шестью разными парами инфицированных и неинфицированных собак. Для каждой пары собак было выполнено 5 повторов. Всего для этого эксперимента было выполнено 30 повторов. Чтобы контролировать любое побочное смещение эффекта, позиции инфицированных и неинфицированных собак менялись местами в каждой повторности. Работа выполнена в лаборатории уровня биобезопасности 2.

    Мы сравнили плодовитость москитов, питавшихся инфицированными и неинфицированными собаками. Набухших самок содержали по отдельности в стеклянных флаконах (высотой 5 см и 2.Диаметром 5 см), содержащую небольшую влажную фильтровальную бумагу, с доступом к вате, смоченной в растворе сахарозы (30%). Флаконы поддерживали при 27 ° C и относительной влажности 90% в герметичных полиэтиленовых контейнерах. Мух обследовали ежедневно в течение 10 дней после кормления кровью; те из инфицированных групп, которые умерли накануне, были вскрыты и исследованы на наличие паразитов в кишечнике. Только те мухи, у которых наблюдались паразиты (N = 75), считались инфицированными и использовались в анализе.Для каждой самки песчаной мухи регистрировали количество отложенных яиц и яиц, оставшихся в яичниках после смерти. Поскольку этот эксперимент занимает очень много времени, мы сравнили плодовитость подгруппы москитов, которых кормили две пары инфицированных и неинфицированных собак. Таким образом, с первой парой собак мы обследовали 47 самок, налившихся на инфицированной собаке, 42 — на неинфицированной собаке, а для 2 и пар собак — 25 самок налились на инфицированной собаке и 30 — на неинфицированной собаке.

    Оценка привлекательности

    Phlebotomus perniciosus для инфицированных и неинфицированных собак в полевых условиях

    Это исследование проводилось в эндемичной зоне для ZVL, где P . perniciosus — самый многочисленный вид песчаных мух, за которым следует P . perfiliewi [30]. Исследование проводилось в течение 9 ночей подряд в сентябре 2019 года, что соответствует основному пику активности P . perniciosus и P . perfiliewi [31], в сельском собачьем питомнике (36 ° 58’N, 10 ° 03’E), лицензированном Министерством сельского хозяйства и принадлежащем мухафазе Ариана на севере Туниса.

    Был проведен эксперимент для определения предпочтения преимущественно дикого P . perniciosus и во-вторых P . perfiliewi для инфицированных (симптоматических) или неинфицированных (бессимптомных) собак. Три клетки (100 × 90 × 100 см) были размещены на земле в виде треугольника на равном расстоянии (20 м) друг от друга (). Мы использовали одну пару собак, которую использовали в предыдущих лабораторных экспериментах. В одну клетку мы поместили зараженную собаку, а в 2 и — неинфицированную парную собаку. Клетку 3 rd оставили пустой в качестве отрицательного контроля.Песчаных мух собирали в клетки с помощью липких ловушек, сделанных из 13 листов белой бумаги (20 см x 20 см; общая площадь 1 м 2 ), пропитанных касторовым маслом. Клейкие ловушки были прикреплены на высоте 1 м над землей и равномерно распределены вдоль шнура вокруг верхней части клетки (). Плотность выражается как количество москитов каждого вида на 1 м 2 липких ловушек.

    Эксперимент по привлечению внимания хозяев на местах.

    Животные были протестированы между 18: 00–06: 00 HR и получали воду ad libitum в течение ночи.Эксперимент повторяли 9 раз, и клетки вращали между разными положениями, чтобы избежать позиционного смещения. Песчаные мухи, собранные с помощью липких ловушек, были подсчитаны и идентифицированы до уровня вида с помощью идентификационных ключей [32,33]. Нетипичная форма P . perniciosus самок, часто ошибочно идентифицируемых как P . longicuspis , посчитали как P . perniciosus [34,35]. Другие виды песчаных мух, собранные на ловушках, были идентифицированы до уровня вида с использованием тех же вышеупомянутых ключей.

    Статистический анализ

    Чтобы исследовать предпочтение песчаных мух для инфицированных или неинфицированных собак в лабораторных условиях, мы сначала сравнили количество самок мух, выбравших сторону A или C, с использованием обобщенной линейной модели (GLM). Для проверки значимых эффектов использовали дисперсионный анализ типа II (ANOVA). Успех кормления был проанализирован с использованием данных о соотношении (привлеченные самки / кормление самок), поскольку входное количество самок в каждой клетке было разным. Успех кормления анализировали с помощью GLM.Значительные эффекты были проверены с помощью ANOVA. Апостериорные анализы были выполнены с использованием оцененных маржинальных средних (EMMEANS). Плодовитость была проанализирована с использованием модели лайнера, и значительные эффекты были определены с помощью ANOVA. Количество москитов и яиц дано как среднее ± стандартная ошибка. Точно так же пропорции накормленных москитов (т. Е. Количество кормящихся самок, деленное на количество привлеченных самок) даны как среднее значение ± стандартная ошибка.

    Для анализа привлекательности P . perniciosus для инфицированных и неинфицированных собак в естественной среде, GLM с ошибкой Пуассона использовался для сравнения количества москитов между каждым лечением.Значительные взаимодействия и эффекты были протестированы с использованием ANOVA. Апостериорные анализы были выполнены с использованием EMMEANS. Среднее — это среднее количество образцов на переменную в разных повторностях. P -значения менее 0,05 считались значимыми, и все анализы были выполнены с использованием R v. 3.6.0.

    Результаты

    Привлекательность

    Phlebotomus perniciosus для инфицированных и неинфицированных собак в лабораторных условиях

    Количество самок P . perniciosus , привлеченных к инфицированным собакам, и неинфицированным собакам были 205,30 ± 16,94 и 80,57 ± 7,82 соответственно, а 18,80 ± 6,25 не ответили (NR) (). Привлекательность собак значительно различалась в зависимости от их инфекционного статуса (ANOVA: F = 66,709, DF = 2, P <0,001), и инфицированные собаки привлекали значительно больше P . perniciosus самок, чем неинфицированных собак (EMMEANS: z = 5,989, P <0,001,).

    Среднее количество самок P . perniciosus привлекали неинфицированных и инфицированных собак в лабораторных условиях.

    Ось Y представляет количество москитов, собранных из клетки с наживкой с зараженной собакой и из клетки с неинфицированной собакой. Ось X представляет инфекционный статус собак. Ящики ограничены минимальным и максимальным значением. Планки погрешностей соответствуют стандартной ошибке. Код значимости: p≤0.001 ***.

    Номера женских П . perniciosus , питавшиеся инфицированными и неинфицированными собаками, были (186.16 ± 16,98) и (66,83 ± 7,58) соответственно. Пропорция P . perniciosus самок, питавшихся инфицированными и неинфицированными собаками, были 0,90 ± 0,02 и 0,81 ± 0,03 соответственно (). На успех кормления в значительной степени влиял инфекционный статус собак (ANOVA: F = 7,5714, DF = 1, P = 0,0079). Пропорция P . perniciosus самок, которые питались инфицированными собаками, были значительно выше, чем доля, питавшаяся неинфицированными собаками (EMMEANS: z = 2.805, Р = 0,005; ).

    Доля женщин P . perniciosus питался неинфицированными и инфицированными собаками в лабораторных условиях.

    Ось Y представляет собой долю самок, наживших наживку с инфицированной собакой, и клетки с неинфицированной собакой. Ось X представляет инфекционный статус собак. Ящики ограничены минимальным и максимальным значением. Планки погрешностей соответствуют стандартной ошибке. Код значимости: p≤0.01 **.

    Количество яиц, отложенных каждой самкой P . perniciosus на инфицированных и неинфицированных собаках составляли 36,46 ± 0,16 и 43,35 ± 0,15 соответственно (). На плодовитость сильно влиял инфекционный статус собак (ANOVA: F = 13,35, DF = 1, P <0,001). Самки, которые питались инфицированными собаками, откладывали значительно меньше яиц, чем самки, которые питались неинфицированными собаками (EMMEANS: t = -3,654, P <0,001).

    Среднее количество яиц, отложенных P . perniciosus питался неинфицированными vs.зараженные собаки.

    По оси Y отложено количество яиц, отложенных P . perniciosus , скармливаемый инфицированным и неинфицированным собакам, ось X представляет инфекционный статус собак. Код значимости: p≤0.001 ***.

    Количество отложенных яиц у самок, питавшихся инфицированными собаками, составляло 2,35 ± 0,09, а у самок, питавшихся неинфицированными собаками, было 1,27 ± 0,09 (). Точно так же статус инфекции хозяина влияет на количество задержанных яиц (ANOVA: F = 73,605, DF = 1, P <0.001).

    Среднее количество отложенных яиц в P . perniciosus кормили неинфицированных и инфицированных собак в лабораторных условиях.

    Ось Y представляет количество отложенных яиц в P . perniciosus питался инфицированными и неинфицированными собаками. Ось X представляет инфекционный статус собак. Код значимости: p≤0.001 ***.

    Привлечение москитов к инфицированным и незараженным собакам в полевых условиях

    Всего за 27 ночей отлова было собрано 1939 москитов. Phlebotomus perniciosus был самым многочисленным видом песчаных мух (n = 1228, 63,3%), за которым следовало P . perfiliewi (n = 662, 34,1%). Остальными видами песчаных мух были Phlebotomus papatasi (n = 11, 0,56%) и Sergentomyia minuta (n = 38, 1,96%).

    Номера П . perniciosus , привлеченных к инфицированной собаке, неинфицированной собаке и холостому контролю, составили 20,44 ± 4,71, 46,78 ± 7,62 и 1,89 ± 0,63 соответственно ().В целом, была значительная (ANOVA: F = 35,8120, DF = 2, P <0,001) разница в числах P . perniciosus, собранных в разные клетки. Зараженная собака привлекла еще P . perniciosus , чем неинфицированная собака (MCP: z = 3,666, P <0,001). И инфицированных, и неинфицированных собак привлекли еще P . perniciosus , чем пустая клетка (MCP: неинфицированные: z = 3,679, P <0,001; инфицированные: z = 5.079, P <0,001).

    Среднее количество P . perniciosus привлекали неинфицированных и инфицированных собак в полевых условиях.

    Ось Y представляет количество москитов, собранных из клетки с наживкой с инфицированной собакой, из клетки с незараженной собакой и из клетки без наживки. Ось X представляет инфекционный статус собак. Ящики ограничены минимальным и максимальным значением. Планки погрешностей соответствуют стандартной ошибке. Код значимости: p≤0.001 ***.

    Количество пойманных самок было значительно выше (30,07 ± 6,43), чем количество самцов (16,00 ± 4,02) (MCP: z = 2,933, P = 0,00335) (). Номер женский Р . perniciosus , заключенные в клетки с наживкой с инфицированной собакой (59,44 ± 11,82), было значительно больше, чем количество пойманных самцов (34,11 ± 8,18) (EMMEANS: z = 2,933, P = 0,0393). Аналогично количество женских Р . perniciosus в клетке с наживкой с неинфицированной собакой (29.11 ± 7,31) было значительно больше, чем количество пойманных самцов (11,78 ± 4,70) (EMMEANS: z = 2,933, P = 0,0393). Номер мужской Р . perniciosus , заключенных в клетки с наживкой с инфицированной собакой (34,11 ± 8,18), было значительно больше, чем среднее количество самцов, пойманных в клетку с наживкой с неинфицированной собакой (11,78 + 4,70) (EMMEANS: z = 3,666, P = 0,0034) (). Аналогично среднее количество самок P . perniciosus в клетке с наживкой с инфицированной собакой (59.44 + 11,82) было значительно выше, чем среднее количество самок, пойманных в клетки с наживкой с неинфицированной собакой (29,11 + 7,31) (EMMEANS: z = 3,666, P = 0,0034).

    Среднее количество мужчин и женщин P . perniciosus привлекали неинфицированных и инфицированных собак в полевых условиях.

    Ось Y представляет количество москитов, собранных из клетки с наживкой с инфицированной собакой, из клетки с незараженной собакой и из клетки без наживки.Ось X представляет инфекционный статус собак. Ящики ограничены минимальным и максимальным значением. Планки погрешностей соответствуют стандартной ошибке. Код значимости: p≤0.01 **; p≤0,001 ***.

    Номера П . perfiliewi , привлеченных к инфицированной собаке, неинфицированной собаке и пустой контрольной клетке, составили 27,22 ± 8,79, 9,39 ± 2,59 и 0,17 ± 0,09 соответственно (). В целом разница между номерами P . perifiliewi , собранные в клетках с инфицированной собакой, неинфицированной собакой и пустой контрольной клеткой, были статистически значимыми (ANOVA: F = 94.715, DF = 2, P <0,001). Зараженная собака привлекла еще P . perfiliewi , чем неинфицированная собака (EMMEANS: z = 7,931, p <0,001). И инфицированных, и неинфицированных собак привлекли еще P . perfiliewi , чем пустая контрольная клетка (EMMEANS: инфицированные: z = 13,440, P <0,001; неинфицированные: z = 9,005, P <0,001).

    Среднее количество P . perfiliewi привлекали неинфицированных и инфицированных собак в полевых условиях.

    Ось Y представляет количество москитов, собранных из клетки с наживкой с инфицированной собакой, из клетки с незараженной собакой и из клетки без наживки. Ось X представляет инфекционный статус собак. Ящики ограничены минимальным и максимальным значением. Планки погрешностей соответствуют стандартной ошибке. Код значимости: p≤0.001 ***.

    Всего, количество мужчин и женщин P . perfiliewi, пойманных, были 4,59 ± 1,49 и 19,53 ± 6,29 соответственно. Среднее количество пойманных самок было значительно выше, чем количество самцов (EMMEANS: z = 10.52, P <0,001). Номер женский Р . perfiliewi , пойманных в клетку с наживкой с инфицированной собакой (44,22 ± 15,56), было значительно больше, чем количество пойманных самцов (10,22 ± 3,79) (EMMEANS: z = 10,425, P <0,001). Точно так же среднее количество (среднее ± стандартная ошибка) женщин P . perfiliewi , пойманных в клетку с наживкой с неинфицированной собакой (15,44 ± 4,30), было значительно больше, чем количество пойманных в ловушку самцов (3,33 ± 0.88) (EMMEANS: z = 7,344, P <0,001). Номер мужской Р . perfiliewi , заключенных в клетку с наживкой с инфицированной собакой, было значительно больше, чем среднее количество самцов, пойманных в клетку с наживкой с неинфицированной собакой (EMMEANS: z = 3,990, P = 0,0013). Точно так же среднее количество (среднее ± стандартная ошибка) женщин P . perfiliewi , заключенных в клетку с наживкой с инфицированной собакой, было значительно выше, чем среднее количество самок, пойманных в клетку с наживкой с неинфицированной собакой (EMMEANS: z = 9.260, P <0,001).

    Обсуждение

    В этом исследовании мы исследовали влияние инфекции L . infantum о привлекательности собак как в лаборатории, так и в полевых условиях в естественном очаге передачи. Мы проверили привлекательность шести пар собак, соответствующих по полу и возрасту, одна собака была инфицирована (с симптомами), а другая не инфицирована в обоих исследованиях. Наши результаты показали, что собаки инфицированы L . infantum были очень привлекательны как для женщин, так и для мужчин P . perniciosus . У москитов был выбор ориентации на любого из потенциальных хозяев, но во всех шести лабораторных репликах (парах собак) самка P . perniciosus были значительно больше привлечены инфицированными, чем неинфицированными собаками. Точно так же мы наблюдали тот же образец ответа, когда одна из пары собак подвергалась воздействию дикой популяции P . perniciosus .

    Успех кормления P . perniciosus значительно выше у инфицированных собак по сравнению с неинфицированными.Однако P . perniciosus , которые питались неинфицированными собаками, отложили значительно больше яиц, чем те, которые питались собаками, инфицированными L . младенец . Подобные результаты наблюдались, когда P . langeroni и L . longipalpis кормили искусственно на L . infantum инфицированной крови [36,37]. Пока долговечность л, . longipalpis был уменьшен после искусственного кормления на L . infantum инфицированной крови, значительного влияния на плодовитость не сообщалось [38]. Все вышеупомянутые исследования были получены на искусственно зараженных москитах. Поскольку мы использовали естественную систему паразит-вектор-хозяин, наши результаты убедительно свидетельствуют о том, что L . Инфекция infantum оказала отрицательное влияние на плодовитость P . perniciosus . Ресурсы для производства яиц могут быть отвлечены, чтобы ограничить сокращение продолжительности жизни после заражения L . младенец . Эта гипотеза заслуживает дальнейшего изучения.

    Наше исследование не полностью определило, была ли повышенная привлекательность инфицированных собак, которую мы наблюдали, результатом запаха хозяина, тепловых, визуальных или акустических (или комбинации некоторых или всех) сигналов. Однако весьма вероятно, что москиты преимущественно реагируют на запахи. Несколько исследований показали, что запахи собак изменяются с помощью L . infantum инфекция. Magalhaes et al.(2014) [39] идентифицировали 35 летучих органических компонентов (ЛОС), выделяемых инфицированными собаками, которые количественно или качественно отличались от неинфицированных собак и могли быть признаны биомаркерами инфекции. Аналогичным образом, исследование с использованием анализатора ЛОС (eNose) показало, что собаки естественно инфицированы L . Профиль запаха infantum в Бразилии значительно отличался от профиля неинфицированных собак [40].

    Несколько других исследований неприродных систем заражения, которые также показали, что запах животных, инфицированных L . infantum играет важную роль в повышении привлекательности инфицированного животного. Nevatte et al. (2017) [24] показали, что привлекательность золотых хомяков (которые не заражаются естественным путем с L . infantum ) до L . longipalpis значительно увеличилось после заражения. Изменение привлекательности было связано со стадией инфекции, и это изменение было более выраженным у одних людей, чем у других [24].

    Подобные результаты были получены с другими системами вектор-паразит-хозяин.Заражение мыши паразитом Plasmodium chabaudii , этиологическим агентом малярии грызунов, вызывает повышенную привлекательность Anopheles stephensi [41]. Четкое различие в ЛОС мышей, инфицированных P . chabaudii по сравнению с таковыми у неинфицированных мышей [41]. Аналогичным образом люди инфицированы P . falciparum более привлекательны для Anopheles gambiae [42]. Однако есть свидетельства того, что эффект не может быть универсальным e.грамм. не было существенной разницы в привлекательности песчаной мухи Nyssomyia neivei по отношению к мышам BALB / c, инфицированным Leishmania braziliensis и неинфицированным мышам [43].

    Чтобы подтвердить наши лабораторные результаты, мы проверили привлекательность собак, инфицированных L . infantum в естественных условиях в высокоэндемичном очаге собачьего лейшманиоза. Наши результаты показали, что номер P . perniciosus, собранных из симптоматического клеточного корпуса L . infantum инфицированной собаки было значительно больше, чем количество мух, собранных из клетки с наживкой с неинфицированной собакой. Мы наблюдали такой же образец ответов от дикой популяции P . perfiliewi той же паре собак. Эти данные убедительно свидетельствуют о том, что инфицированные собаки более привлекательны для обоих видов москитов. Номера не L . InfinityНаша гипотеза манипуляции предсказывает, что не будет никакой разницы в привлечении не-переносчиков животных к инфицированным и неинфицированным собакам.

    Повышенная привлекательность P . perniciosus и P . perfiliewi для собак, инфицированных L . infantum в естественных условиях, скорее всего, обусловлен различием в кайромонах, продуцируемых инфицированными и неинфицированными собаками. Следствием этой манипуляции могло стать усиление успешной передачи паразита L . infantum вектор. В будущем было бы интересно определить, когда происходит повышенный успех передачи по отношению к жизненному циклу паразита в организме хозяина.

    Наше исследование показало, что хотя и самки, и самцы P . perniciosus были привлечены к неинфицированным собакам, они были значительно больше привлечены к инфицированным собакам как в лабораторных, так и в полевых исследованиях. Реакция самцов, показанная здесь, контрастирует с реакцией самцов L . longipalpis наблюдали в других исследованиях, в которых не было повышенного влечения самцов к инфицированному хомячку [24]. Это исследование преодолевает ограничения ранее описанной работы, так как оно частично проводилось в полевых условиях с присутствием диких москитов в эндемичном очаге ZVL и, таким образом, является наиболее точным представлением естественной передачи.

    На основе анализа муки из крови P . Считается, что perniciosus питается условно-патогенными микроорганизмами на любых доступных хозяевах [21,44–47].Нет полевых исследований по P . perniciosus были проведены для исследования их относительной привлекательности для разных хозяев. Есть свидетельства того, что L . longipalpis выбирает хозяев на основании их относительного размера, а не вида [48], его также обычно считают оппортунистическим питателем. Общее зоофильное пищевое поведение P . perniciosus и L . longipalpis , основанный на доступности хозяина, а не на привлекательности для конкретных хозяев, должен приводить к разбавлению паразита по мере его распространения на некомпетентных хозяев, что впоследствии окажет зоопрофилактический эффект на передачу L . infantum [49]. Наша работа иллюстрирует потенциальный эффект зоопотенцирования, оказываемый инфицированными резервуарными хозяевами, которые очень привлекательны для переносчиков песчаных мух L . младенец . Кроме того, это убедительно свидетельствует о том, что инфицированные собаки являются основным резервуаром-хозяином, поскольку выделяемые различные компоненты запаха и / или различные концентрации являются значительно привлекательными для P . perniciosus по сравнению с другими запахами окружающей среды. Эта манипуляция запахом обеспечивает успешную передачу паразита переносчику.Таким образом, химическая экология регулирует L . infantum -собака- P . perniciosus отношения, и, следовательно, он имеет прямое влияние на динамику передачи ZVL.

    Хотя было показано, что инфекция Leishmania может влиять на количество проглоченной крови и частоту приема пищи песчаной мухой, тем самым увеличивая скорость передачи паразита [38,50], неизвестно, могут ли паразиты влиять на привлекательность хозяина для песочных мух.Известно, что некоторые паразиты манипулируют своими животными-хозяевами, изменяя их физиологию или поведение, чтобы повысить вероятность передачи инфекции [22]. Наши результаты убедительно свидетельствуют о том, что паразит изменяет физиологию собаки так, что она становится более привлекательной для самки P . perniciosus , что способствует его успешной передаче.

    В нескольких исследованиях сообщалось, что у собак с симптомами инфицирования L . infantum очень заразны для своих переносчиков-песчанок по сравнению с олигосимптомными и бессимптомными собаками [51–58].Одно из объяснений этой разницы может быть связано с относительной привлекательностью инфицированных и неинфицированных собак с симптомами заболевания для их переносчиков-песчанок. Со временем будет интересно определить, являются ли инфицированные бессимптомные и олигосимптомные собаки столь же привлекательными для переносчиков-песчанок, как и собаки с симптомами.

    Большая привлекательность инфицированных собак по сравнению с неинфицированными собаками будет иметь большое эпидемиологическое значение. В эндемичных для ZVL районах Туниса до 50% собак инфицированы L . infantum [4], поэтому понимание механизмов, лежащих в основе разницы в привлекательности, могло бы помочь в разработке новых подходов к снижению скорости инфицирования переносчиком и, следовательно, к снижению передачи паразита. Также важно понимать, как паразит может управлять передачей и, таким образом, влиять на модели передачи.

    Благодарности

    Авторы хотели бы поблагодарить Патрика Шлуппа за его ценный вклад в полевые исследования.

    Отчет о финансировании

    EZ and AS получили финансирование от Национального института здравоохранения США — грант номер R21AI130485 и грант Wellcome Trust номер 209336 / Z / 17/7. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе или анализе данных, решении опубликовать или подготовке рукописи.

    Доступность данных

    Все соответствующие данные находятся в рукописи.

    Список литературы

    1. Desjeux P. Лейшманиоз: текущая ситуация и новые перспективы.Сравнительная иммунология, микробиология и инфекционные болезни. 2004; 27 (6): 305–318. 10.1016 / j.cimid.2004.03.004 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 2. Альвар Дж., Велес И.Д., Берн С., Эрреро М., Дежо П., Кано Дж. И др. Лейшманиоз во всем мире и глобальные оценки его заболеваемости. PLoS One. 2012; 7 (5): e35671. DOI: 10.1371 / journal.pone.0035671
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Алвар Дж., Яктайо С., Берн С. Лейшманиоз и бедность. Тенденции паразитологии. 2006; 22 (12): 552–557.DOI: 10.1016 / j.pt.2006.09.004
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4. Zoghlami ZE, Chouihi E, Barhoumi W., Dachraoui K, Massoudi Ben Helel K, Habboul Z и др. Взаимодействие между висцеральными лейшманиозами собак и человека в голоэндемическом очаге Центрального Туниса. Acta Tropica. 2014; 139: 32–38. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2014.06.012
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Бельхадж С., Джайт-Баракет З., Джемли Б., Беносман А., Чакер Э. Leishmanioses viscérales et cutanées du Nord: Etude rétroactive des cas diagnostiques à l’hôpital La Rabat de Tunis.Bulletin de la Société de Pathologie Exotique, 1996; 89 (4): 269–273. [PubMed] [Google Scholar] 7. Бен Хелель К., Бен Реджеб М., Хаббул З., Хаттат Н., Межауэль Х., Саид-Латири Х. и др. Факторы риска смертности детей от зоонозного висцерального лейшманиоза в Центральном Тунисе. PLoS One. 2017; e0189725. DOI: 10.1371 / journal.pone.0189725
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 8. Аун К., Дивани М. Ф., Бениклеф Р., Буратбин А., Бенхаджали С., Харрат З. и др. Leishmania infantum MON-1: seul zymodème isolated chez les chiens leishmaniens en Tunisie.Бюллетень Общества Экзотической Патологии. 2003; 96 (2): 77–79. [PubMed] [Google Scholar] 9. Бен Слиман Т., Чоуихи Э., Бен Хадж Ахмед С., Челби И., Бархуми В. и др. Исследование вертикальной передачи Leishmania infantum у экспериментально инфицированных собак и оценка потенциальной заразности потомства с помощью ксенодиагностики. Ветеринарная паразитология. 2014; 206 (3–4): 282–286. DOI: 10.1016 / j.vetpar.2014.10.020
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Куиннелл Р.Дж., Куртенэ О.Передача, резервуарные хозяева и борьба с зоонозным висцеральным лейшманиозом. Паразитология. 2009; 136: 1915–1934. DOI: 10.1017 / S00311820099

    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Бен Исмаил Р. Инкриминирование Phlebotomus perniciosus связано с Leishmania infantum . Архивы Institut Pasteur Tunis. 1993; 70 (3): 91–110. [Google Scholar] 12. Бархуми В., Фарес В., Черни С., Дербали М., Дахрауи К., Челби И. и др. Изменения в популяциях песчаных мух и случаев заражения Leishmania infantum в орошаемой деревне, расположенной в засушливом Центральном Тунисе.Международный журнал исследований окружающей среды и общественного здравоохранения. 2016; 13 (3): 329. 10.3390 / ijerph23030329. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13. Мароли М., Грамичия М., Градони Л. Естественные инфекции песчаной мухи Phlebotomus perfiliewi с Leishmania infantum в очаге кожного лейшманиоза в регионе Абруцци, Италия. Труды Королевского общества тропической медицины и гигиены. 1987; 81 (4): 596–598. DOI: 10.1016 / 0035-9203 (87)

  • -2
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14.Izri MA, Belazzoug S. Phlebotomus ( Larrousius ) perfiliewi , естественно инфицированный деромтропным веществом Leishmania infantum в Тенесе, Альгерия. Труды Королевского общества тропической медицины и гигиены. 1993; 87 (4): 399. doi: 10.1016 / 0035-9203 (93)

    -e
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Кааби Б., Чжиуа Э. Моделирование и сравнительное исследование распространения зоонозного висцерального лейшманиоза от Северного до Центрального Туниса. Acta Tropica. 2018; 178: 19–26.DOI: 10.1016 / j.actatropica.2017.10.013
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 16. Догерти Х.Дж., Геррен П.М., Уорд Р.Д., Гамильтон JGC. Поведенческие и электрофизиологические реакции москитов-флеботоминов Lutzomyia longipalpis ( Diptera: Psychodidae ) при воздействии кайромонов запаха псовых хозяев. Физиологическая энтомология. 1999; 24 (3): 251–262. 10.1046 / j.1365-3032.1999.00139.x [CrossRef] [Google Scholar] 17. Мачадо В.Е., да Роча Сильва Ф. Б., де Оливейра С. М., Буэно А. С., Франсиско А. А., Ортис Д.Г.С., Гуларт TM, Пинто М.С.Ecologia química de flebotomíneos, глава 9 в: Atualidades em Medicina Tropical no Brasil: Vetores eds: Jader de Oliveira et al. 2020; 10.35170 / ss.ed.9786586283129 [CrossRef] [Google Scholar] 18. Нигам Y, Ward RD. Влияние феромона самцов москитов и факторов хозяина как аттрактантов для самок Lutzomyia longipalpis ( Diptera: Psychodidae ). Физиологическая энтомология. 1991; 16 (3): 305–312. 10.1111 / j.1365-3032.1991.tb00569.x [CrossRef] [Google Scholar] 19. Брей Д.П., Гамильтон JGC.Запах хозяина усиливает притяжение девственной самки Lutzomyia longipalpis ( Diptera: Psychodidae ). Журнал медицинской энтомологии. 2007. 44 (5): 779–787. DOI: 10.1603 / 0022-2585 (2007) 44 [779: hosaov] 2.0.co; 2
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Spiegel CN, душ Сантуш Диас DB, Araki AS, Hamilton JGC, Brazil RP, Jones TM. Комплекс Lutzomyia longipalpis : краткая естественная история взаимодействия агрегации и полового феромона. Паразиты и переносчики. 2016; 9: 580. DOI: 10.1186 / с13071-016-1866-х
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Чарги Н., Слама Д., Хауас Н., Рмади Л., Бабба Х. Анализ цикла передачи в фокусе Leishmania infantum : уровни инфицирования и происхождение кровяной муки у москитов ( Diptera: Psychodidae ). Журнал векторной экологии. 2018; 43 (2): 321–327. DOI: 10.1111 / jvec.12316
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 22. Пулин Р. «Адаптивные» изменения в поведении паразитированных животных: Критический обзор. Международный журнал паразитологии.1995; 25 (12): 1371–1383. DOI: 10.1016 / 0020-7519 (95) 00100-х
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. О’Ши Б., Реболлар-Теллез Э., Уорд Р. Д., Гамильтон JGC, эль-Наием Д., Полварт А. Повышенное привлечение москитов к хозяевам, инфицированным Leishmania . Труды Королевского общества тропической медицины и гигиены 2002; 96 (2): 117–118. DOI: 10.1016 / s0035-9203 (02)

    -7
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Nevatte TM, Ward RD, Sedda L, Hamilton JGC. После заражения Leismania infantum золотые хомячки ( Mesocricetus auratus ) становятся более привлекательными для самок москитов ( Lutzomyia longipalpis ).Научные отчеты. 2017; 7,6104, DOI: 10.1038 / s41598-017-06313-w
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25. Мароли М., Фиорентино С., Гуандалини Э. Биология лабораторной колонии Phlebotomus perniciosus (Diptera: Psychodidae). Журнал медицинской энтомологии. 1987; 24: 547–551. DOI: 10.1093 / jmedent / 24.5.547
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 26. Chelbi I, Zhioua E. Биология Phlebotomus papatasi Scopoli ( Diptera: Psychodidae ) в лаборатории.Журнал медицинской энтомологии. 2007; 44 (4): 597–600. DOI: 10.1603 / 0022-2585 (2007) 44 [597: boppdp] 2.0.co; 2
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Bouratbine A, Aoun K, Gharbi M, Haouas N, Zaroui J, Harrat Z, и др. Données épidémiologiques, Cliniques et parasitologique sur la leishmaniose générale canine en Tunisie. Бюллетень Общества Экзотической Патологии. 2005; 98: 359–362. [PubMed] [Google Scholar] 28. Chelbi I, Zhioua E. Учреждение, поддержание Phlebotomus spp. в лаборатории и заражение Leishmania spp.Методы молекулярной биологии, Leishmania. 2019; 351–368. [PubMed] [Google Scholar] 29. Куртенэ О., Карсон С., Кальво-Бадо Л., Гарсес Л. М., Куиннелл Р. Дж. Неоднородность инфекции Leishmania infantum : Использование кожных паразитов для выявления высокоинфекционных собак. PLoS «Забытые тропические болезни». 2014; 8, e2583. DOI: 10.1371 / journal.pntd.0002583
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Жиуа Э., Кааби Б., Челби И. Энтомологические исследования после распространения висцерального лейшманиоза в Тунисе.Журнал векторной экологии. 2007; 32 (2): 371–374. DOI: 10.3376 / 1081-1710 (2007) 32 [371: eiftso] 2.0.co; 2
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31. Бишо Л., Дахрауи К., Пиорковски Г., Челби И., Муро Г., Черни С. и др. Выделение вируса Тоскана от москитов, Тунис. Возникающие инфекционные заболевания. 2013; 19 (2): 322–324. DOI: 10.3201 / eid1902.121463
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Croset H, Rioux JA, Master M, Bayar N. Les phlébotomes de la Tunisie ( Diptera, Phlebotominae ).Mise au point systématique, chorologique et éthologique. Annales de Parasitologie Humaine and Comparée. 1978; 53 (6): 711–749. 10.1051 / parasite / 1978536711 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Léger N, Pesson B, Madulo-Leblond G, Abonnenc E. Sur la différentiation des femelles du sous-genre Larroussius Nitzulescu, 1931 ( Diptera: Phlebotominae ) de la région méditerranéenne. Annales de Parasitologie Humaine and Comparée. 1983; 58 (6): 611–623. 10.1051 / parasite / 1983586611 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34.Пессон Б., Готовый JS, Бенабденнби И., Мартин-Санчес Дж., Эссегир С., Кади-Сусси М., Морильяс-Маркес Ф., Ready PD. Песчаные мухи комплекса Phlebotomus perniciosus : митохондриальная интрогрессия и новый вид-родственник Phlebotomus longicuspis в Марокканском Риф. Медицинская и ветеринарная энтомология. 2004; 18 (1): 25–37. DOI: 10.1111 / j.0269-283x.2004.0471.x
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Boussaa S, Boumezzough A, Remy PE, Glasser N, Pesson B. Морфологическая и изоферментная дифференциация Phlebotomus pernicious и Phlebotomus longicuspis (Diptera: Psychodidae) в Южном Марокко.Acta Tropica. 2008; 106 (3): 184–189. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2008.03.011
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Эль-Саваф Б.М., Эль-Саттар С.А., Шехата М.Г., Лейн Р.П., Морси Т.А. Снижение продолжительности жизни и плодовитости москитов, инфицированных Leishmania . Американский журнал тропической медицины и гигиены. 1994; 51: 767–770. [PubMed] [Google Scholar] 37. Агрела ИФ, Фелициангели MD. Влияние инфекции Leishmania spp на выживаемость, продолжительность жизни, плодовитость и фертильность Lutzomyia longipalpis s.л. и Lutzomyia pseudolongipalpis . Memorias Instituto Oswaldo Cruz. 2015; 110: 611–617. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 38. Роджерс МЭ, Бейтс ПА. Leishmania Манипуляции с питанием песчаной мухи приводят к усилению передачи. PLoS Патогены. 2007; 3 (6): e91. DOI: 10.1371 / journal.ppat.0030091
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39. Magalhaes-Junior JT, Mesquita PRR, dos Santos Olivera WF, Santos Olivera F, Franke CR, de Medeiros Rodrigues F, et al.. Идентификация биомаркеров в шерсти собак: новые диагностические возможности в изучении висцерального лейшманиоза и борьбе с ним. Аналитическая и биоаналитическая химия. 2014; 406: 6691–6700. DOI: 10.1007 / s00216-014-8103-2
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Станиек М.Э., Седда Л., Гибсон Т.Д., де Соуза К.Ф., Коста Е.М., Диллон Р.Дж. и др. Анализ эНоз летучих химических веществ от собак, естественно инфицированных Leishmania infantum в Бразилии. PLoS «Забытые тропические болезни». 2019; 13, e0007599.DOI: 10.1371 / journal.pntd.0007599
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Де Мораес С.М., Станчик Н.М., Бец Х.С., Пулидо Х., Сим Д.Г., Рид А.Ф. и др. Изменения запахов хозяина, вызванные малярией, усиливают привлекательность комаров. Труды Национальной академии наук США. 2014; 111 (30): 11079–11084. DOI: 10.1073 / pnas.1405617111
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 43. Rocha Silva FB, Miguel DC, Machado VE, Oliveira WHC, Goulart TM, Tosta CD и др .. Влияние инфекции Leishmania (Viannia) braziliensis на привлекательность мышей BALB / c для Nyssomyia neivai (Diptera: Diptera: Diptera: ).PLoS One. 2019; 14 (4), e0214574. DOI: 10.1371 / journal.pone.0214574
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44. Бонджорно Дж., Хаблютцель А., Хури С., Мароли М. Предпочтения хозяев песчаных мух с флеботомином в гипоэндемическом очаге собачьего лейшманиоза в центральной Италии. Acta Tropica. 2008; 88 (2): 109–116. 10.1016 / s0001-706x (03) 00190-6 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 45. Майя С., Дионисио Л., Афонсу М. О., Нето Л., Кристован Дж. М., Кампино Л. Инфекция Leishmania и предпочтения флеботомных москитов и собачьего лейшманиоза в отношении кормления кровью хозяина в эндемичной европейской зоне, регионе Алгарве в Португалии.Memórias do Instituto Oswaldo Cruz. 2013; 108 (4): 481–487. DOI: 10.1590 / S0074-0276108042013014
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 46. Браво-Баррига Д., Паррейра Р., Майя С., Афонсу М. О., Бланко-Сьюдад Дж, Серрано Ф. Дж. И др .. Обнаружение ДНК Leishmania и источников кровяной муки у флеботоминовых песчаных мух (Diptera: Psychodidae) на западе Испании: обновленная информация о распространении и связанных факторах риска. Acta Tropica. 2016; 164: 414–424. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2016.10.003
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 47.Беннаи К., Тахир Д., Лафри И., Бенджабаллах-Лалиам А., Битам И., Парола П. Молекулярное обнаружение ДНК Leishmania infantum и идентификация муки крови хозяина в Phlebotomus в гипоэндемическом очаге лейшманиоза человека на севере Алжира. PLoS «Забытые тропические болезни». 2018; e0006513. DOI: 10.1371 / journal.pntd.0006513
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 48. Quinnell RJ, Dye C, Shaw JJ. Предпочтения хозяев москитов-флеботоминов Lutzomyia longipalpis в Амазонии, Бразилия.Медицинская и ветеринарная энтомология. 1992. 6 (3), 195–200. DOI: 10.1111 / j.1365-2915.1992.tb00606.x
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 49. Александр Б., Лопес де Карвалью Р., МакКаллум Н., Перейра М. Х. Роль домашней курицы (Gallus gallus) в эпидемиологии городского висцерального лейшманиоза в Бразилии. Возникающие и инфекционные заболевания. 2002; 8 (12): 1480–1485. DOI: 10.3201 / eid0812.010485
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 50. Роджерс ME. Роль протеофосфогликанов Leishmania в передаче насекомых и инфицировании млекопитающего-хозяина.Фронт в микробиологии. 2012; 3: 223, DOI: 10.3389 / fmicb.2012.00223
    [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 51. Градони Л., Мароли М., Грамиция М., Манчианти Ф. Уровень инфицирования Leishmania infantum среди Phlebotomus perniciosus , питавшихся естественно инфицированными собаками при лечении сурьмой. Медицинская и ветеринарная энтомология. 1987; 1 (4): 339–342. DOI: 10.1111 / j.1365-2915.1987.tb00364.x
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 52. Молина Р., Амела С., Санд-Андрес М., Гонсалес Ф., Кастильо Дж. А., Люсьентес Дж. И др.. Инфекционность собак, естественно инфицированных Leishmania infantum , до колонизированного Phlebotomus perniciosus . Труды Королевского общества тропической медицины и гигиены. 1994; 88 (4): 491–493. DOI: 10.1016 / 0035-9203 (94)

    -4
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 53. Гуарга Дж. Л., Люсьентес Дж., Перибанес М. А., Молина Р., Гарсия М. Дж., Кастильо Дж. А. Экспериментальное заражение Phlebotomus perniciosus и определение естественных показателей заражения Leishmania infantum у собак.Acta Tropica. 2000; 77 (2): 203–207. DOI: 10.1016 / s0001-706x (00) 00141-8
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 54. Гуарга Дж. Л., Морено Дж., Люсьентес Дж., Грасиа М. Дж., Перибанез М. А., Альвар Дж. И др. Передача собачьего лейшманиоза: высокая инфекционность среди естественно инфицированных собак москвичам связана с более низкой долей Т-хелперных клеток. Исследования в области ветеринарии. 2000; 69 (3): 249–253. 10.1053 / rvsc.2000.0419 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 55. Vexenat JA, Fonseca de Castro JA, Cavalcante R, Tabares JP, da Silva MRB, Furtado Campos JH, et al.. Висцеральный лейшманиоз в Терезине, штат Пиауи, Бразилия: предварительные наблюдения за обнаружением и переносимостью коллекций собак и москитов. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz. 1994; 82 (2): 131–135. 10.1590 / S0074-02761994000200001 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 56. Tarvi BL, Tabares CJ, Cadena H, Ferro C, Osorio Y. Висцеральный лейшманиоз собак в Колумбии: взаимосвязь между клиническим и паразитологическим статусом и инфекционностью для москитов. Американский журнал тропической медицины и гигиены.2001; 64 (3–4): 119–124. https://doi.org/ 10.4269 / ajtmh.2001.64.119 [PubMed] [Google Scholar] 57. Да Коста-вал А.П., Кавальканти Р.Р., Де Фигейредо Контихо Н., Михалик МСМ, Александр Б., Уильямс П. и др. Висцеральный лейшманиоз собак: взаимосвязь между клиническим статусом, гуморальным иммунным ответом, гематологией и луцомией ( луцомия ) longipalpis инфекционность. Ветеринарный журнал. 2007; 174 (3): 636–643. 10.1016 / j.tvjl.2006.11.006. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 58.Михальский Е.М., Роша М.Ф., да Роча Лима ACVM, Франса-Сильва Дж.С., Пирес М.К., Оливера Ф.С. и др. Инфекция серопозитивных собак, демонстрирующих различные клинические формы лейшманиоза, по отношению к Lutzomyia longipalpis флеботоминам. Ветеринарная паразитология. 2007; 147 (1–2): 67–76. DOI: 10.1016 / j.vetpar.2007.03.004
    [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    Рождественский календарь с 8 собаками на 2021 год, подарки для вашего щенка на это Рождество

    Марисса Миллер
    | Reviewed

    — Рекомендации выбираются независимо редакторами Reviewed.Покупки, которые вы совершаете по нашим ссылкам, могут приносить нам комиссию.

    Подготовка к праздникам — это семейное дело. А учитывая, что наши пушистые друзья являются такой же частью семьи, как и все остальные, они тоже заслуживают того, чтобы проникнуться праздничным настроением. С календарем собачьего адвента на 2021 год ваш щенок будет отсчитывать дни до Рождества прямо здесь с вами — или, по крайней мере, выпрашивать их ежедневное угощение.

    Вот восемь самых популярных и уникальных рождественских календарей для домашних животных в дизайне, удобном для щенков, с угощениями, игрушками и многим другим.

    Сделайте свой праздничный шоппинг рано с предложениями и советами экспертов, доставленными прямо на ваш телефон. Подпишитесь на рассылку текстовых сообщений от команды поиска сделок на Reviewed.

    1. Этот календарь из печенья для гурманов

    Кто украл печенье из адвент-календаря? Ваша собака! Каждый из 25 слотов включает в себя различное печенье ручной работы для гурманов, которое может понравиться вашему щенку, например, арахисовое масло и тыквенное печенье, украшенное беззерновой тапиокой и глазурью из йогурта.

    «[Печенье] слишком восхитительно, чтобы давать щенкам есть», — бредит один человек. «Но я сделал, и они их любят».

    Приобретите Dantes Doggy Delights 2021 Gourmet Dog Treat Advent Calendar от Etsy для $ 42,23

    2. Этот персонализированный адвент-календарь

    Сделайте вашу собаку настоящей королевской особой с помощью адвент-календаря, украшенного ее именем. Хотя они, возможно, не смогут его прочитать, возможно, они почувствуют заботу. Изготовлен из войлока и имеет 25 сшитых вручную карманов, которые вы можете заполнить любимыми лакомствами и игрушками вашей собаки.

    «Качество моего адвент-календаря было безупречным», — пишет один рецензент. «Детали невероятны. Это полностью превзошло мои ожидания ».

    Получите «Карманы обучения» персонализированный адвент-календарь для собак от Etsy за 37,95 долларов США

    3. Этот календарь лакомств для щенков

    Побалуйте свою собаку собственным деревом, которое поставляется с угощениями или без них, и в праздничных оттенках на ваш выбор как охотник зеленый и белоснежный. У елки есть 25 карманов, чтобы ваш щенок взбесился перед большим днем, и оно сделано из мягкого войлочного материала, с которым они могут, а могут и не захотеть обниматься.Можем ли мы предложить надеть прилагаемый бант на шею вашей собаки в качестве нарядного наряда?

    «Он абсолютно идеален! — пишет один человек. — Он такой, такой милый и великолепно украшенный. Я обязательно куплю его снова, мне он очень нравится».

    Приобретите ручной адвент-календарь для щенков Madison от Etsy по цене от 19,95 долл. США

    4. Этот календарь для натуральных лакомств

    Если вы и ваш щенок стремитесь к здоровью, позвольте им приступить к новогоднему решению на месяц раньше с этим адвент-календарем, наполненным 25 натуральными угощениями.Каждое угощение состоит всего из двух ингредиентов и на 95 процентов состоит из мяса, такого как филе утки, куриный бургер и индейка в форме маленьких звездочек. Кроме того, вы должны полюбить очаровательную праздничную графику с животными.

    «Оба моих дедушки любят эти угощения по календарю и каждое утро садятся рядом с ними, — пишет один человек. — Оно сделано из обезвоженного мяса без наполнителей, так что это беспроигрышный вариант и очень экономичный с точки зрения качества и количества угощений. Он был фаворитом прошлого года и снова стал хитом в этом году! »

    Получите Рождественский календарь для собак с 35 натуральными лакомствами от Walmart за 21 доллар.46

    5. Этот календарь игрушек для собак

    Если ваша собака сидит на специальной диете и не может играть в русскую рулетку с угощениями из рождественского календаря, она будет в равной степени обрадована новой игрушкой в ​​день. Адвент-календарь Wondershop укомплектован 12 различными игрушками на праздничную тематику, такими как кольцо с шипами для мягкого жевания, теннисный мяч для игры в ловлю, завязанные веревки для соревновательной игры в перетягивание каната и плюшевые игрушки, которые пищат для стимулирования различных органов чувств. .

    «Нашему новому щенку это понравится на первое Рождество», — пишет один рецензент.«Это очень мило. Мне нравится, что я вижу игрушки с одной стороны, а пронумерованные двери — с другой».

    Приобретите подарочный набор игрушек для собак с рождественским календарем Wondershop от Target за 30 долларов США.

    6. Этот многоразовый рождественский календарь

    . сохраните традицию в течение нескольких предстоящих праздничных сезонов.Этот многоразовый рождественский календарь — отличный способ ограничить одноразовое потребление пластика и угостить собаку едой и игрушками, которые, как вы знаете, она уже любит.Каждый ящик размером один на один дюйм содержит 25 слотов.

    «Отличный продукт, как и ожидалось», — пишет один человек. «[Календарь] в точности соответствует рекламе и отлично подходит для тех, кто не желает рисковать дешевыми угощениями, которые поставляются с некоторыми календарями для собачьих адвентов. Так я смогу наполнить его угощениями, которые, как я знаю, не вызовут у нее тошноту.

    Получите рождественскую коробку для рождественских угощений Midlee от Amazon за 27 долларов

    7. Этот календарь с печеньем для гурманов

    Эта индивидуальная иллюстрированная коробка с магнитной застежкой является одновременно подарком для вашей собаки и праздничным декором. курортный сезон необходим.Каждый из 25 слотов заполнен печеньем в форме кости одного из трех цветов. Все ингредиенты, такие как цельнозерновая мука, яблочное пюре, мед и кокос, относятся к человеческому уровню и местного производства, а это означает, что они безопасны для употребления в пищу человеком, хотя больше всего они нравятся вашему питомцу. В последний день календаря Адвента ваша собака найдет печенье большего размера в форме лапы. Все, чего не хватает, — это высокая пятерка (или высокая лапа) от владельца в честь праздника.

    «Наш щенок любит эти лакомства», — пишет один человек.«Он с трудом сдерживается, когда видит, что после ужина каждый вечер выходит рождественский календарь для его особого угощения. У него есть некоторые проблемы с желудочно-кишечным трактом, но эти угощения совсем не беспокоят его. Мы обязательно будем покупать снова следующей осенью».

    Приобретите адвент-календарь от Wüfers за 59,95 долларов США

    8. Этот очень большой адвент-календарь

    В течение 24 дней ваша собака сможет насладиться пастушьим буйволом на свободном выгуле из Индии, который, как говорят, содержать меньше жира и больше белка, чем другие популярные виды кормов для собак.Каждый кусочек, от вяленых полосок до печеночных палочек, покрыт медом, полученным экологически чистыми методами, для придания сладкого и пикантного вкуса.

    «Отличный календарь, — пишет один рецензент. — Я был приятно удивлен, насколько велик календарь. Стелла встает каждое утро и сидит посреди пола, пока кто-нибудь ее не угостит ».

    Приобретите очень большой рождественский календарь Honey I’m Home на Amazon за 29,99 долларов США

    Не упустите возможность задержаться с доставкой или распродать любимые товары в этот праздничный сезон. Подпишитесь на нашу бесплатную еженедельную рассылку и получайте обзоры продуктов, предложения и руководства по праздничным подаркам, которые вам нужны, чтобы начать делать покупки прямо сейчас.

    Эксперты по продуктам в Reviewed удовлетворят все ваши потребности в покупках. Подпишитесь на Reviewed на Facebook , Twitter , Instagram , TikTok или Flipboard , чтобы узнать о последних предложениях, обзорах продуктов и многом другом.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.